[发明专利]一种防治香蕉冠腐病的芽孢杆菌及其应用

说明书

技术领域

本发明属于微生物领域，涉及一种防治香蕉冠腐病的生防菌株B28及其应用。

背景技术

由香蕉炭疽菌（Colletotrichum musae）、可可球二孢菌（Botryodiplodia theobromae）、奇异长喙壳菌（Ceratocystis paradoxa）、串珠镰刀菌（Fusarium moniliforme）、半裸镰刀菌 （Fusarium semitectum）等真菌感染引起的香蕉冠腐病能导致15—30%的香蕉果实腐烂，由此每年造成的损失近4.2—8.4亿元。为了减少香蕉的腐烂，延长货架期，香蕉采收后都要用杀菌剂处理，杀死或抑制果实上的真菌，减少由真菌引起的果实腐烂。目前，香蕉果实的防腐主要靠化学防腐剂，常用的化学防腐剂有三唑类杀菌剂(敌力脱、晴氨唑、 氟硅唑)， 咪唑类（施保克、施保功），特克多，扑海因，咪鲜安，苯来特，多菌灵，甲基托布津等。化学防腐剂处理香蕉果实，有一部分会残留在果实上，人食用后会进入人体，引起急性或慢性中毒；同时，化学防腐剂还会进入水体、土壤、空气等地方造成环境污染；更为重要的是，化学防腐剂的大量使用，使病菌产生抗药性，使很多防腐剂失去了作用。生物防腐剂是由对人畜和环境安全的活的微生物菌体及其分泌的抗真菌物质组成，施用在香蕉果实上，对人无毒无害，人食用后很安全；对环境安全，进入自然环境后不污染环境。

发明内容

本发明的目的是提供了一种安全、高效的防治香蕉冠腐病的芽孢杆菌，该芽孢杆菌，容易在香蕉上定植和成活，不易死亡，药效期长；长期和大量使用病菌不易产生抗药性。

为了实现上述目的，本发明的技术方案为：提供一种防治香蕉冠腐病的芽孢杆菌，其中，该芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌B28, 于2011年2月28日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为CGMCC No.4623。

该枯草芽孢杆菌B28培养基为：牛肉膏1～3g、蛋白胨8～10g、酵母膏0.8～1g、NaCl 1～3g、蒸馏水1000毫升，初始pH值7.2～7.4，30℃，160转每分钟振荡培养48小时，培养后离心的温度0～4℃ ，离心转速为4000～6000rpm，离心时间为15～40min。

本发明还提供一种枯草芽孢杆菌B28的应用，该枯草芽孢杆菌B28制备的生防菌剂用于防治香蕉冠腐病，该生防菌剂中枯草芽孢杆菌B28含量为10⁹-10¹¹cfu/ml。

生防菌剂是将枯草芽孢杆菌B28培养后离心浓缩，低温干燥后加蒸馏水制得，最终活性菌的浓度为10⁹-10¹¹cfu/ml。

该枯草芽孢杆菌B28为菌体杆状，周生鞭毛，芽孢位于菌体中间，芽孢椭圆形，孢囊不膨大，菌体大小0.4-0.6μm×1.2-2.3μm；革兰氏染色阳性，在NYDA培养基上24h内形成圆形、光滑、平坦、乳白色、中间细颗粒状菌落；菌氧化葡萄糖产酸，过氧化氢酶、V.P.反应、硝酸盐还原阳性，能液化明胶，能利用柠檬酸盐，能利用L-阿拉伯糖、D-木糖、D-甘露醇，能在含10%NaCI的培养基中生长，生长温度10-50度。

具体实施方式

本发明所提供的香蕉冠腐病生防菌剂其活性成分为枯草芽孢杆菌B28（Bacillus subtilis）活菌。

生防菌剂中枯草芽孢杆菌B28（Bacillus subtilis）含量为10⁹-10¹¹cfu/ml,优选为10¹⁰cfu/ml。

生防菌剂是将枯草芽孢杆菌B28（Bacillus subtilis）培养后离心浓缩，低温干燥后加蒸馏水制得，最终活性菌的浓度为10⁹-10¹¹cfu/ml。

这里B28（Bacillus subtilis）培养基优选为：牛肉膏1-3g、蛋白胨8-10g、酵母膏0.8-1g、NaCl 1～3g、蒸馏水1000毫升，初始pH值7.2-7.4，30℃，160转每分钟振荡培养48小时。培养后离心的温度0～4℃ ，离心转速为4000～6000rpm，离心时间为15～40min。

本生防菌剂存放期7个月，枯草芽孢杆菌B28（Bacillus subtilis）芽孢存活率为92.84%。

使用方法：用冷水稀释10倍，浸泡香蕉。浸泡采后的香蕉果实，对香蕉冠腐病的防效可达67.5%。