[发明专利]麦槽中阿魏酸及低聚木糖分离纯化的方法无效
申请号: | 201210331544.7 | 申请日: | 2012-09-07 |
公开(公告)号: | CN102876753A | 公开(公告)日: | 2013-01-16 |
发明(设计)人: | 李夏兰;方柏山;陈培钦;程珊影;张兰 | 申请(专利权)人: | 华侨大学 |
主分类号: | C12P19/14 | 分类号: | C12P19/14;C12P7/42 |
代理公司: | 泉州市文华专利代理有限公司 35205 | 代理人: | 车世伟 |
地址: | 362000 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 麦槽中 阿魏酸 低聚木 糖分 纯化 方法 | ||
1.一种麦槽中阿魏酸及低聚木糖的分离纯化方法,其特征在于:具体操作步骤如下:
(1)制备麦糟的乙醇不溶物:先把麦糟浸没在体积分数为85%的乙醇中煮沸5min后冷却、过滤,重复两次;之后依次用无水乙醇和乙醚清洗过滤后的麦糟并烘干;接着将烘干后的麦糟采用珠磨机粉碎并过50目的土样筛,得到麦糟的乙醇不溶物;
(2)制备酶解液:称取步骤(1)所得的麦糟的乙醇不溶物,按料液比1∶8加入0.1mol/L NaOH溶液,浸泡24h后,再用功率为264w的微波处理20min后离心;之后将离心后的溶液的pH值调至5.0并冷却至45℃时,加入50U/mL的木聚糖酶粗酶液反应12h后,再加入40mU/mL的阿魏酸酯酶粗酶液反应12h后离心得沉淀、及上清液即酶解液;
(3)分离纯化:取100mL步骤(2)所得的酶解液并调节pH值至7.0,之后将酶解液以0.5mL/min的流速上已平衡好的活性炭柱,待该100m L酶解液全部上柱后,采用去离子水冲洗2h,且流速为1.0mL/min,接着用300mL0%-30%的乙醇溶液进行梯度洗脱,然后用100mL无水乙醇恒定洗脱,再用100mL质量浓度为2%的NaOH溶液恒定洗脱,且各洗脱速率均为1.0mL/min,并分别收集各乙醇洗脱液与NaOH洗脱液,获得低聚木糖和阿魏酸;
所述步骤(2)中的料液比为质量体积比。
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