[发明专利]玉米浸泡水发酵生产γ-聚谷氨酸的方法

权利要求书

1.一种玉米浸泡水发酵生产γ-聚谷氨酸的方法，包括下列步骤：

（1）玉米浸泡水沉淀：新鲜玉米浸泡水于储罐沉淀24 h或采用板框过滤、离心分离；

（2）去除沉淀物：打开储罐底阀，排除沉淀物，无絮状物时即为排放完全；

（3）输送玉米浸泡水：将除沉淀的玉米浸泡水用泵输送到发酵配料岗位的储罐内备用；

（4）配料：按照配比，将各种原料称量好，溶解完全配成发酵培养基，

发酵培养基原料配比：葡萄糖40 g，谷氨酸钠 30 g，K₂HPO₄ 20 g，蛋白胨5 g，酵母膏5 g，MgSO₄·7H₂O 0.25 g，CaC1₂ 0.25 g，用1L玉米浸泡水配制，pH 7.0；

（5）灭菌：将配好的发酵培养基灭菌，采用连消的方式灭菌，121-125 ℃，灭菌10-15 min，将连消好的培养基在发酵罐内冷却至37 ℃，等待接种；

（6）接种发酵：一株从土壤中筛选枯草芽孢杆菌，Bacillus,subtilis，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏号为CGMCC No. 6421，保藏日期2012.8.13；

5 L发酵罐，装液量3 L，接种量为10%(v/v)，发酵过程中采用5mol/L  NaOH和2mol/L H₂SO₄，pH为6.0，搅拌转速为150~200 rpm，通气量为1.0 vvm，发酵温度为37 ℃，发酵时间为24~28 h；

（7）提取：将发酵液8000 r/min离心25 min去菌体，收集上清液用盐酸调pH至3.5，加入3倍体积的冷无水乙醇，低温静止过夜，倾去上清液得粗品；用适量蒸馏水溶解粗品，用透析袋进行脱盐，进行真空冷冻干燥，得到乳白色晶体。