[发明专利]犬融合干扰素

说明书

技术领域

本发明关于动物保健领域，特别是关于一种具有抗病毒活性的犬融合干扰素。

背景技术

干扰素最早是在1957年由英国学者Alick Isaacs和Jean Lindenmann在进行流感病毒试验中所发现，当细胞遭受病毒感染后，会立即制造一种细胞激素，诱发邻近细胞产生抗病毒蛋白，干扰病毒的复制。该细胞激素随后被命名为干扰素(Interferon，IFN)。

干扰素为一种醣蛋白，主要有干扰素α、β、γ三种，可经由不同的病原进行诱发产生，例如：病毒、细菌、立克次体、原虫及双股核苷酸等；诱发后的干扰素不会与病原直接作用，而是经由诱导产生抗病毒蛋白以达到抗病毒的功能，这些抗病毒蛋白包括依赖双股RNA的蛋白激活酶(dsRNA-dependent protein kinase，PKR)、Mx蛋白(Mx protein)及2’，5’-寡腺苷酸合成酶(2’，5’Oligoadenylate synthetase/RNase L，OAS)等。其中PKR为一种蛋白质激酶，可使eIF2磷酸化，使宿主细胞停止转译病毒蛋白；Mx蛋白则是一种三磷酸鸟苷酸水解酶(GTPase)，可与病毒蛋白结合而干扰病毒的复制及蛋白质的运输；而OAS则可将病毒的双股RNA进行水解。另一方面，干扰素也会诱导邻近细胞产生抗病毒蛋白阻碍病毒感染其他细胞，并让细胞建立抗病毒状态，达成干扰病毒感染的效用。除了具有抗病毒作用外，干扰素还具有抗肿瘤、促进细胞分化和免疫调节等功用。

目前市面上的干扰素制剂，多为针对人类所开发设计，例如：用来治疗人类B型与C型肝炎等病毒性疾病以及卡波西氏瘤(Kaposi’s sarcoma，KS)、黑色素肿瘤(malignant melanoma)等肿瘤疾病上的干扰素。

近年来，受到高龄化、少子化的社会趋势所影响，宠物数量越来越多，也连带带动许多宠物相关行业的发展，其中最普遍的宠物-狗，也逐渐在人类工作上扮演重要角色，根据美国宠物商品制造协会(APPMA)调查显示，美国宠物相关行业的产值在2009年已达520亿美元，其中宠物医疗约占40％(约208亿美元)，宠物药品约占24％(约124.8亿美元)，而在宠物药品中，抗生素制剂及皮肤照护用品约占70％，其余30％则为疫苗及治疗性药物，其中治疗性药物种类少但是价格高，是一个极具有发展潜力的市场。本发明即是针对犬只开发专用之干扰素作为治疗性药物。

发明内容

本发明于第一部分中提供一种犬融合干扰素。由于干扰素属于小分子蛋白质，在体内半衰期短(约2～8小时)且不稳定，因此本发明所提供的犬融合干扰素是将犬干扰素蛋白与半衰期较长的犬免疫球蛋白IgG Fc片段融合，而形成较稳定的犬融合干扰素。于一较佳实施例中，该犬干扰素蛋白以及该犬免疫球蛋白IgG Fc片段是以由甘胺酸(Glycine，G)及丝胺酸(Serine，S)组成的连接子(linker)所连接起来的。于一实施例中，该犬干扰素蛋白为犬干扰素α2，具有如SEQ ID No：2所示之胺基酸序列；该犬免疫球蛋白IgG Fc片段具有如SEQ ID No：4所示之胺基酸序列；而该连接子具有如SEQ ID No：6所示之胺基酸序列；该犬融合干扰素具有如SEQ ID No：8所示之胺基酸序列。

本发明于第二部分中提供一种编码上述犬融合干扰素的多核苷酸。本发明所提供之犬融合干扰素是藉由基因转殖技术而得。首先将编码犬干扰素蛋白的DNA序列，以及编码犬免疫球蛋白IgG Fc片段的DNA序列选殖到表现载体系统中，形成含有编码犬融合干扰素之DNA序列的质体，再将该质体转殖到表现系统中，经诱导蛋白质表现后而得到犬融合干扰素。

于一较佳实施例中，除了将编码犬干扰素蛋白的DNA序列以及编码犬免疫球蛋白IgG Fc片段的DNA序列选殖到表现载体系统中，并将编码由甘胺酸及丝胺酸组成的连接子(linker)的DNA序列选殖到该表现载体系统中，以连接该编码犬干扰素蛋白的DNA序列以及编码犬免疫球蛋白IgG Fc片段的DNA序列。于一实施例中，该编码犬干扰素蛋白的DNA序列具有如SEQ ID No：1所示之序列，该编码犬免疫球蛋白IgG Fc片段的DNA序列具有如SEQ ID No：3所示之序列，而该编码由甘胺酸及丝胺酸组成的连接子(linker)的DNA序列具有如SEQ ID No：5所示之序列；该编码犬融合干扰素的DNA序列具有如SEQ ID No：7所示之序列。