[发明专利]一种沃尼妙林脂质体的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于兽药技术领域，具体涉及一种沃尼妙林脂质体的制备方法。

背景技术

沃尼妙林是新一代截短侧耳素类半合成抗生素，属二萜烯类，与泰妙菌素属同一类药物，是动物专用抗生素，主要用于防治猪、牛、羊及家禽的支原体病和革兰氏阳性菌感染。沃尼妙林的作用机制是在核糖体水平上抑制细菌蛋白质的合成，高浓度时也抑制RNA的合成。主要是抑菌，高浓度时也杀菌。抗菌谱广，对G+和G-菌有效，对霉形体属和螺旋体属高度有效。

沃尼妙林的药动学特征是吸收快、吸收率高、药效好、生物利用度高，但有效血药浓度维持时间短，药物消除较快，休药期为1d。沃尼妙林的普通制剂，如预混剂，用药后在血液及组织中均匀分布，没有靶向性，且药物进入血液循环后，要与蛋白结合，经受多种酶、组织、器官的代谢和排泄等，只有少量药物能够达到靶部位。如果要提高靶区的药物浓度，就必须增加剂量，这不仅增加成本，造成药物的浪费，也增大了药物的毒副作用和药物在体内的残留，增加了产生耐药性的可能性。

发明内容

本发明的目的是提供一种沃尼妙林脂质体的制备方法，从而增加其水溶性，延长药物的有效作用时间，增加其稳定性和靶向性，减少临床用药次数。

为了实现以上目的，本发明所采用的技术方案是：一种沃尼妙林脂质体的制备方法，包括以下步骤：

1）配制浓度为25mg/ml的NaHCO₃溶液；

2）配制柠檬酸缓冲液；

3）空白脂质体的制备：称取0.3质量份的磷脂和0.1质量份的胆固醇，加入无水乙醇于60～70℃水浴中溶解，挥散乙醇成膜后，加入同温的柠檬酸缓冲液20份，60～70℃水浴中搅拌水化10min，后在30～60℃下搅拌40～50min，充分水化后补加蒸馏水至20份，所得脂质体溶液通过微孔滤膜过滤整粒；

4）称取沃尼妙林原粉加入乙醇中搅拌至充分溶解，制成浓度为3mg/ml的沃尼妙林药液；

5）主动载药：依次取沃尼妙林药液、NaHCO₃溶液加入到空白脂质体中混匀，70℃水浴中保温20min，随后立即用冷水降温，得脂质体粗品；

6）低温高速离心处理步骤5）所得粗品，制得沃尼妙林脂质体。

步骤2）中柠檬酸缓冲液的pH为3.0～6.0。

步骤3）中微孔滤膜的孔径为0.8μm。

步骤5）中沃尼妙林药液、NaHCO₃溶液和空白脂质体的体积比是1:1:4。

步骤6）中低温高速离心的温度为4℃，转速为15000r/min，离心时间20min。

步骤6）中经低温高速离心处理后的精制沃尼妙林脂质体经浓缩，真空冻干，制得沃尼妙林脂质体冻干制剂。

沃尼妙林脂质体经过无菌处理之后，4℃保存，而冻干制剂可常温保存，不仅保存时间长，而且便于运输。

脂质体是将药物包封于类脂质双分子层内而形成的微型泡囊体，利用脂质体可以和细胞膜融合的特点，将药物送入细胞内部。脂质体具有类细胞结构，进入体内主要被网状内皮系统吞噬而激活机体自身的免疫功能，并改变包封药物的体内分布，使药物主要在肝、脾、肺和骨髓等组织器官中积蓄，从而提高药物的治疗指数，减少药物的治疗剂量和降低药物的毒性。脂质体的特点是具有靶向性和淋巴定向性，缓释作用，降低药物毒性，提高稳定性。

本发明通过制备NaHCO₃溶液、柠檬酸缓冲液、空白脂质体和沃尼妙林药液，主动载药制备沃尼妙林脂质体，该方法简单易行，所需设施简单，原料易取，在实际生产中容易实施。通过将沃尼妙林制成脂质体的形式，提高其在水中的溶解度，延长该药物在体内的有效作用时间，增加其稳定性和靶向性，降低毒副作用，减少临床用药次数。

具体实施方式

以下结合具体实施方式对本发明做详细说明：

实施例1

本实施例沃尼妙林脂质体的制备方法，包括以下步骤：

1）配制浓度为25mg/ml的NaHCO₃溶液；

2）配制pH为6.0的柠檬酸缓冲液；

3）空白脂质体的制备：称取0.3质量份的磷脂和0.1质量份的胆固醇，加入无水乙醇于60℃水浴中溶解，挥散乙醇成膜后，加入同温的柠檬酸缓冲液20份，60℃水浴中搅拌水化10min，后在30℃下搅拌50min，充分水化后补加蒸馏水至20份，所得脂质体溶液通过微孔滤膜过滤整粒；

4）称取沃尼妙林原粉加入乙醇中搅拌至充分溶解，制成浓度为3mg/ml的沃尼妙林药液；