[发明专利]分离并检测罗氟司特及其中间体的方法

说明书

技术领域

本申请涉及药物的分离及检测方法，特别是涉及分离并检测罗氟司特及其中间体的方法。

背景技术

欧盟已于2010年7月批准由Nycomed公司制造的药物—罗氟司特(roflumilast，Daxas)上市，以用于治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)。罗氟司特为选择性磷酸二酯酶4(PDE4)抑制剂，是十多年来首次获得欧盟批准的新一类治疗COPD的药物。

通常需要经过几个关键的中间体合成步骤来化学合成罗氟司特。因此，罗氟司特中可能残留有各种中间体，这会影响到罗氟司特作为药物应用的质量和纯度。因此，建立罗氟司特及其中间体的分离检测方法以控制其质量和纯度是非常必要的，其中化学合成罗氟司特的各个中间体及罗氟司特的结构如下所示：

3,4-二羟基苯甲醛（中间体1）

3-羟基-4-(二氟甲氧基)苯甲醛（中间体2）

3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯甲醛（中间体3）

3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯甲酸（中间体4）

4-氨基-3,5-二氯吡啶（中间体5）

3-(环丙基甲氧基)-N-(3,5-二氯吡啶-4-基)-4-(二氟甲氧基)苯甲酰胺（罗氟司特）

从上述化合物的化学结构中可知，3,4-二羟基苯甲醛（中间体1）与4-氨基-3,5-二氯吡啶（中间体5）具有非常高的极性，它们与罗氟司特及其它中间体的极性显著不同。当采用色谱法进行分离时，在相同的色谱条件下，具有非常高极性的中间体1和中间体5化合物通常在1-2分钟出峰，而罗氟司特及其它中间体通常在60~80分钟出峰，甚至不出峰。因此，在常规条件下将罗氟司特与各个中间体同时分离并检测出是非常困难的，而且迄今为止，尚没有任何文献报道能成功地分离并检测出罗氟司特及其中间体的方法。

发明概述

本申请的一方面涉及分离并检测罗氟司特及其中间体的方法，所述方法通过高效液相色谱法采用线性梯度洗脱方式对罗氟司特及其中间体进行分离并检测，其中实施高效液相色谱法的条件为：高效液相色谱仪所用的色谱柱为反相色谱柱，流动相A为含有离子对试剂的pH=2~7.5的缓冲液，流动相B为甲醇或乙腈，检测波长为215nm。

本申请的另一方面涉及本申请的分离并检测罗氟司特及其中间体的方法在含有罗氟司特的药品的质量控制和质量检测中的用途。

在本文所述的分离并检测罗氟司特及其中间体的方法中，通过在缓冲液中加入离子对试剂，使极性高的物质极性降低，从而增加了其在色谱柱上的保留时间，避免其出峰过快而无法定量分析。同时，通过采用线性梯度洗脱方式使得能够同时分离并检测出罗氟司特及其所有中间体，而且各成分峰与相邻峰之间的分离度高，符合液相色谱的分离度要求。

附图说明

图1罗氟司特及其中间体分离度考察的HPLC图

图2罗氟司特及其中间体分离度考察的HPLC图

图3罗氟司特及其中间体分离度考察的HPLC图

图4罗氟司特及其中间体分离度考察的HPLC图

图5罗氟司特及其中间体分离度考察的HPLC图

图6罗氟司特及其中间体分离度考察的HPLC图

图7罗氟司特及其中间体分离度考察的HPLC图

具体实施方式

以下的描述包括某些具体细节以便透彻理解各种公开的实施方案。然而，相关领域技术人员应当理解，可以无需一种或多种这些具体细节，或者可以使用其它方法、成分、材料等实践实施方案。

整个说明书中所提及的“一实施方案”、“实施方案”、“在另一实施方案中”、“某些实施方案”或“在某些实施方案中”是指与所述实施方案相关的所描述的具体涉及的特征、结构或者特性被包括在至少一实施方案中。因此，在整个本说明书中的各个地方出现的短语“在一实施方案中”、“在实施方案中”、“在另一实施方案中”或者“在某些实施方案中”不必均指相同的实施方案。此外，具体特征、结构或者特性可以在一种或多种实施方案中以任何适当的方式相结合。

一方面，本申请涉及分离并检测罗氟司特及其中间体的方法，所述方法通过高效液相色谱法采用线性梯度洗脱方式对罗氟司特及其中间体进行分离并检测，其中实施高效液相色谱法的条件为：高效液相色谱仪所用的色谱柱为反相色谱柱，流动相A为含有离子对试剂的pH=2~7.5的缓冲液，流动相B为甲醇或乙腈，检测波长为215nm。