[发明专利]一种藏药烈香杜鹃及其制剂的质量检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种质量检测方法，具体涉及一种藏药烈香杜鹃及其制剂的质量检测方法。

背景技术

烈香杜鹃（Rhododendron anthopogoniodes Maxim.et Franch）为杜鹃花科植物烈香杜鹃的干燥花和叶或带叶嫩枝，系常用藏药材，性味：甘、涩，平；具有清热消肿，补肾的功效，主要用于气管炎，肺气肿，浮肿，身体虚弱及水土不适，消化不良，胃下垂，胃扩张，外用治疮疬。《月王药诊》记载：“治龙、赤巴、培根病、脾胃虚寒、消化不良、水土不服。”《晶珠本草》记载：“滋补益寿，治寒性培根病。”《味气铁鬘》记载：味苦、性温、效轻。治培根病。《明释三十章》记载：性温，治培根病、肺病疼痛、呃逆。《图鉴》记载：本品生于高山阴面。树干白色，叶褐色，花白色，味甘、苦、涩，治龙病、赤巴病、培根病、喑哑病、肺病。

烈香杜鹃现已大量应用于藏成药制剂中，藏医常用于培根病、肺病、脾胃虚寒、消化不良、水土不服症等的治疗，该药材收载于《卫生部药品标准》藏药第一册中，原标准除有显微理化鉴别外，未制定任何含量测定方法。

《RP-HPLC测定烈香杜鹃叶总黄酮含量的研究》一文提供了一种烈香杜鹃叶总黄酮含量测定的RP-HPLC方法。该方法以槲皮素、山奈素、异鼠李素3种黄酮甙元的总含量作为烈香杜鹃叶总黄酮含量，但未对供试品中杂质进行处理，干扰成分多，不能准确可靠的说明烈香杜鹃的质量，不适用于制剂中含量的控制。

《藏药烈香杜鹃质量标准研究》一文提供了一种采用高效液相色谱法同时测定烈香杜鹃中金丝桃苷、槲皮素的含量的方法。该方法通过对金丝桃苷、槲皮素的含量测定来控制烈香杜鹃的质量，但是仍不能全面的反应烈香杜鹃的质量。

综上所述：亟需一种可以全面控制藏药烈香杜鹃的检测方法，以保证患者用药的安全有效。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一种藏药烈香杜鹃及其制剂全面的质量检测方法。

为实现上述目的，本发明采用下述技术方案：

一种藏药烈香杜鹃质量检测方法，所述方法包括烈香杜鹃中总黄酮含量测定的紫外分光光度方法，烈香杜鹃中总槲皮素含量测定的高效液相色谱方法，和烈香杜鹃中黄酮类成分HPLC指纹图谱的检测方法中的一种或几种。

优选的，所述质量检测方法包括以下一种或几种：

所述总黄酮的含量测定方法是以金丝桃苷制成对照品溶液，经黄酮的亚硝酸钠和硝酸铝的显色反应（即硝酸铝显色法），通过紫外-可见分光光度法测定不同对照品浓度的吸收度并绘制吸收曲线；将烈香杜鹃粉末经过石油醚除杂后配制供试品溶液，经过硝酸铝显色法显色后，通过紫外-可见分光光度法测定其吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液中总黄酮的含量的方法；

所述总槲皮素含量测定方法是以槲皮素对照品为对照，烈香杜鹃使用酸水解后，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积份数比45:55的甲醇-体积份数比0.5%磷酸水溶液为流动相，检测波长为360nm的高效液相色谱法；

所述黄酮类成分HPLC指纹图谱的检测方法，其是以槲皮素、山奈素、金丝桃苷、芦丁对照品为对照制成四种参照物溶液；色谱条件是：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以异丙醇为流动相B，以体积份数比0.5%磷酸水溶液为流动相C，梯度洗脱，流速为1ml/min，检测波长为360nm；将参照物溶液与供试品所制备的供试品溶液分别注入液相色谱仪，记录色谱图，比较参照物溶液与供试品溶液的相对保留时间和相对峰面积。

上面步骤中，作为进一步之优选，所述总黄酮的含量测定方法中，对照品溶液和供试品溶液均为乙醇为溶剂配制。所述黄酮的亚硝酸钠和硝酸铝的显色反应（即硝酸铝显色法）的步骤是：对照品溶液或供试品溶液均加水至5ml，加重量体积份数比5%亚硝酸钠试液1ml，混匀，放置6分钟，加重量体积份数比10%硝酸铝溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10ml，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟。

上面步骤中，作为进一步之优选，所述总槲皮素含量测定方法中，对照品溶液和供试品溶液均由体积份数比3:1的乙醇-5mol/L盐酸水溶液混合溶液配制，供试品使用回流的方法制备，对供试品进行除杂，使脂类及叶绿素类进行消解，同时使含槲皮素的黄酮苷均水解转化为槲皮素（即总槲皮素包括游离槲皮素和转化之后槲皮素之和），便于测定。而且在此条件下还可以采用山奈素对照品作对照，测量山奈素含量，且与槲皮素互不影响。