[发明专利]荧光增白剂CBS-X检测试剂盒及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种添加剂检测技术，具体来说，特别是涉及一种用于荧光增白剂CBS-X含量的酶联免疫检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

荧光增白剂CBS-X，化学名称为4,4′-双(2-磺酸钠苯乙烯基)联苯，属双二苯乙烯-联苯型光学增白剂，特点是增白强度高,耐氯漂,氧漂性能优良,具有优异的耐洗牢度和干、湿日晒度,匀染性能良好，适合用于洗涤用品，也可直接用于纺织品、纸张的光学增白。

长期以来，荧光增白剂的安全性颇受争议，有资料显示荧光增白剂是低毒的，也有资料显示荧光增白剂的分子结构稳定，不易被分解，在生物体内长期累积，会使细胞发生变异，产生潜在的致癌因素。因此，在未充分评估荧光增白剂的安全性的情况下，并不是所有荧光增白剂都被允许使用，欧盟、美国、日本、中国等许多国家对荧光增白剂都有一定的监管，相关法规如欧盟2002/72/EC指令、美国联邦法规21CFR178.3297和GB 9685-2008《食品容器、包装材料用添加剂使用卫生标准》都制定了允许用于生产塑料食品接触材料和制品的添加剂清单，对允许使用的荧光增白剂的最大添加量进行限制。鉴于此，建立相关产品的荧光增白剂的快速检测方法，开展定期监测和安全性评估，对于规范行业发展，保证产品质量，保护消费者身体健康和保护环境等具有深远的意义。而荧光增白剂CBS-X做为允许添加的荧光增白剂中的一种，也亟需一种合适的快速检测方法。

目前，国内外对荧光增白剂的检测方法包括以下几种：紫外灯直接照射观测法、色谱法、色谱质谱联用法。其中，紫外灯直接照射观测法只是一种简单的判断，不能鉴别荧光增白剂的种类；色谱法和色谱质谱联用法具有特异性高、结果准确的优点，但是这两种方法的缺点是样品前处理繁琐，消耗大量溶剂，且需要昂贵的实验室设备，检测成本高。

发明内容

基于此，本发明在于克服现有技术的缺陷，提供一种荧光增白剂CBS-X检测试剂盒和一种荧光增白剂CBS-X试剂盒制备方法，该试剂盒在检测荧光增白剂CBS-X时可一次连续检测多个样品，具有便捷，快速，灵敏、成本低的特点。

本发明的第一个目的在于提供一种荧光增白剂CBS-X检测试剂盒，其技术方案如下：一种荧光增白剂CBS-X检测试剂盒，主要包括：

1）包被荧光增白剂CBS-X特异性抗原的酶标板：所述酶标板的每个微孔内荧光增白剂CBS-X特异性抗原的浓度为1-3μg/mL；

2）荧光增白剂CBS-X特异性抗体溶液：该荧光增白剂CBS-X特异性抗体的浓度为1-3μg/mL；

所述荧光增白剂CBS-X特异性抗原与荧光增白剂CBS-X特异性抗体溶液的用量比为1：1。

在其中一个实施例中，所述荧光增白剂CBS-X检测试剂盒还包括有酶标二抗，所述酶标二抗是浓度按1:10000比例稀释的辣根过氧化物酶标记羊抗鼠二抗。

在其中一个实施例中，所述荧光增白剂CBS-X特异性抗原的浓度为2μg/mL；所述荧光增白剂CBS-X特异性抗体的浓度为2μg/mL。

在其中一个实施例中，所述荧光增白剂CBS-X检测试剂盒还包括荧光增白剂CBS-X标准品溶液、底物显色剂、洗涤液、终止液、封闭液和浓缩样品稀释液。

在其中一个实施例中，所述特异性荧光增白剂CBS-X特异性抗体是鼠源单克隆抗体；所述荧光增白剂CBS-X特异性抗原为荧光增白剂CBS-X与载体蛋白的偶联物；所述载体蛋白为牛血清白蛋白、卵清蛋白、兔血清白蛋白、甲状腺球蛋白中的一种；所述荧光增白剂CBS-X标准品溶液浓度分别为1×10⁵μg/L、1×10⁴μg/L、1×10³μg/L、1×10²μg/L、1×10¹μg/L、1×10⁰μg/L；所述显色剂由显色剂A和显色剂B组成，所述显色剂A为过氧化氢或过氧化脲，所述显色剂B为邻苯二胺或四甲基联苯胺；所述终止液为1-2mol/L的硫酸溶液；所述洗涤液为含有0.05%-0.5%吐温-20的0.01M，pH7.4的磷酸盐缓冲液；所述封闭液为含5%脱脂奶粉的0.01M，pH7.4的磷酸盐缓冲液；所述浓缩样品稀释液为0.01M，pH7.4的磷酸盐缓冲液；所述酶标板的材料为聚苯乙烯、聚乙烯、聚丙烯中的一种。

本发明的第二个目的在于提供一种荧光增白剂CBS-X检测试剂盒制备方法，主要包括以下步骤：