[发明专利]基于纳米金模拟过氧化物酶的三聚氰胺测定方法

权利要求书

1.一种基于纳米金模拟过氧化物酶的三聚氰胺快速测定方法，其特征是利用纳米金与三聚氰胺相互作用后其模拟过氧化物酶活性的变化，通过纳米金催化过氧化氢氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐显色，根据溶液颜色和紫外吸收光谱特征的变化，来测定三聚氰胺浓度。

2.根据权利要求1所述的基于纳米金模拟过氧化物酶的三聚氰胺快速测定方法，其特征是利用目视观察溶液颜色特征以判断三聚氰胺的浓度。

3.根据权利要求1所述的基于纳米金模拟过氧化物酶的三聚氰胺快速测定方法，其特征是利用吸光度值A₆₅₂以判断三聚氰胺的浓度。

4.根据权利要求1或2或3所述的基于纳米金模拟过氧化物酶的三聚氰胺快速测定方法，其特征是所使用的纳米金采用硼氢化钠还原氯金酸的方法制备，将500 μL浓度为 0.1 g/L 氯金酸水溶液用39.5毫升的水稀释，在剧烈搅拌下加入0.8毫升浓度为0.1 g/L的硼氢化钠水溶液，反应溶液颜色从浅黄色变成酒红色，暗处继续快速搅拌而形成纳米金。

5.根据权利要求4所述的基于纳米金模拟过氧化物酶的三聚氰胺快速测定方法，其特征是按体积比为1:3将纳米金溶液和含不同浓度三聚氰胺的磷酸盐缓冲溶液混合，40℃反应，10000 rpm离心后，取0.2 ml上清液加入0.25 ml浓度为8 mol/L的过氧化氢、0.05 ml浓度为16 mmol/L的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐、0.5 ml浓度为10 mmol/L、pH=4的磷酸盐缓冲溶液，混合后37℃温浴，目视观察颜色特征或测定吸光度值A₆₅₂，当目视观察颜色特征时，随着三聚氰胺浓度的增大，显色液的颜色逐渐由深蓝色变为浅蓝色直至无色，目视观察的检测限为0.02 mg/L；当测定吸光度值A₆₅₂时，随着三聚氰胺浓度的增大而吸光度值A₆₅₂逐渐减小，在5~80 μg/L 范围内吸光度值A₆₅₂与三聚氰胺浓度呈线性关系，检测限为1.2 μg/L。

6.根据权利要求4所述的基于纳米金模拟过氧化物酶的三聚氰胺快速测定方法，其特征是所使用的裸纳米金平均粒径为8.1 nm，最大吸收波长为518 nm。

7.根据权利要求5所述的基于纳米金模拟过氧化物酶的三聚氰胺快速测定方法，其特征是纳米金溶液和含不同浓度三聚氰胺的磷酸盐缓冲溶液的体积分别为0.1 mL和0.3 mL。

8.一种基于纳米金模拟过氧化物酶特性快速测定奶粉中三聚氰胺的方法，包括如下步骤：按体积比为1:3将纳米金溶液和奶粉样品溶液混合，40℃反应，10000 rpm离心，取0.2 ml上清液加入0.25 ml浓度为8 mol/L的过氧化氢、0.05 ml浓度为16 mmol/L的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐、0.5 ml浓度为10 mmol/L、pH=4的磷酸盐缓冲溶液，混合后37℃温浴，目视观察颜色特征或测定吸光度值A₆₅₂，根据溶液颜色与比色标准系列比较或通过吸光度值标准曲线进行定量，获得奶粉中的三聚氰胺含量。

9.根据权利要求8所述的基于纳米金模拟过氧化物酶特性快速测定奶粉中三聚氰胺的方法，其特征是奶粉样品的预处理为：在2.0 g奶粉中加入0.2 mL 浓度为1wt% 三氯乙酸和2.0 mL甲醇，振摇2分钟后取其1.0 mL的上清液，氮气吹干，加入1.0 mL 浓度为0.01 mol/L、 pH=3的磷酸盐缓冲溶液溶解残渣，得样品溶液。

10.根据权利要求8或9所述的基于纳米金模拟过氧化物酶特性快速测定奶粉中三聚氰胺的方法，其特征是所使用的纳米金采用硼氢化钠还原氯金酸的方法制备，将500 μL浓度为 0.1 g/L 氯金酸水溶液用39.5毫升的水稀释，在剧烈搅拌下加入0.8毫升浓度为0.1 g/L的硼氢化钠水溶液，反应溶液颜色从浅黄色变成酒红色，暗处继续快速搅拌而形成纳米金。