[发明专利]一种开裂铁皮石斛蒴果种胚的无菌去毒培养方法

权利要求书

1.一种开裂铁皮石斛蒴果种胚的无菌去毒培养方法，其特征在于包括以下步骤：

1)将开裂的铁皮石斛蒴果进行表面清理；

2）将表面清理过的开裂果荚或种胚进行去毒处理：

将种胚置于超净工作台中紫外照射10~15min，然后在无菌条件下将种胚转移入无菌西林瓶中，之后用质量百分浓度65~75%的酒精浸泡清洗30-60s，然后用无菌滤网将种胚滤出，再用吸有质量百分浓度0.5~1.5%安替福民的无菌吸管将种胚用转移入无菌西林瓶中，浸没消毒10~15min后将种胚用无菌滤网滤出，然后用无菌水将种胚转移入无菌西林瓶中，用无菌水反复冲洗3~5次；

3）最后用无菌水以微滴方式将种胚转移入播种培养基中进行无菌播种培养。

2.根据权利要求1所述的无菌去毒培养方法，其特征在于所述步骤2）中酒精的浓度为质量百分浓度70%，酒精浸泡过程中需翻转混匀摇动。

3.根据权利要求1所述的无菌去毒培养方法，其特征在于所述步骤2）中所述无菌滤网采用160-200目不锈钢无菌滤网。

4.根据权利要求1所述的无菌去毒培养方法，其特征在于所述步骤2）中的安替福民的质量百分浓度为1%。

5.根据权利要求1所述的无菌去毒培养方法，其特征在于所述步骤3）的具体过程为：用无菌水以微滴方式将去毒处理过的种胚转移入播种培养基中，播种培养基为：1/3~1/2MS液体培养基+萘乙酸0.5~1.0mg/L+6-苄氨基腺嘌呤1.0~2.0mg/L+活性炭0.5~1.5g/L，播种后暗培养3~5d后，置于光照1000-1500LUX，温度25±1℃，光照时间12~14h/d的条件下进行培养。