[发明专利]S-苯基-L-半胱氨酸酶法转化制备方法无效
申请号: | 201210251624.1 | 申请日: | 2012-07-20 |
公开(公告)号: | CN102808007A | 公开(公告)日: | 2012-12-05 |
发明(设计)人: | 焦庆才;徐礼生;刘均忠;王治元;张宏娟;刘茜 | 申请(专利权)人: | 南京大学 |
主分类号: | C12P13/04 | 分类号: | C12P13/04;C12R1/19;C12R1/385;C12R1/38;C12R1/125 |
代理公司: | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人: | 胡锡瑜 |
地址: | 210093 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 苯基 半胱氨酸 转化 制备 方法 | ||
1.一种S-苯基-L-半胱氨酸的酶法转化制备方法,其特征是由以下步骤构成:
(1)具有色氨酸合成酶活性的菌株在培养基中培养,产生含色氨酸合成酶的湿菌体;
(2)将含有色氨酸合成酶的湿菌体或粗酶液与含L-丝氨酸的混合氨基酸料液混合,再加入磷酸吡哆醛和表面活性剂和苯硫酚或苯硫酚钠,在25~55℃,pH 6~11条件下进行酶促反应,等电点结晶法分离得到S-苯基-L-半胱氨酸。
2.根据权利要求1所述的S-苯基-L-半胱氨酸酶法转化制备方法,其特征在于步骤(1)所述的菌株是大肠杆菌ATCC15489或 铜绿假单胞菌CGMCC NO:1.1129或施氏假单胞菌CGMCC NO:1.202或枯草芽孢杆菌CGMCC NO:1.1628。
3.根据权利要求1所述的S-苯基-L-半胱氨酸酶法转化制备方法,其特征在于步骤(1)所述的培养基是葡萄糖和麦芽糖和蔗糖和/或果糖,培养基中总碳源质量浓度为5~50 g/L;氮源采用牛肉膏和酵母膏和玉米浆和蛋白胨和/或豆饼水解液,培养基中总氮源质量浓度为1~30 g/L。
4.根据权利要求1所述的S-苯基-L-半胱氨酸酶法转化制备方法,其特征在于步骤(2)所述的含L-丝氨酸的混合氨基酸料液来源于角蛋白水解液或蚕丝水解液或酶法合成L-丝氨酸的反应液,混合氨基酸料液中总氨基酸含量为1%~50%重量百分比,其中L-丝氨酸在总氨基酸中含量为5%~95%重量百分比。
5.根据权利要求1所述的S-苯基-L-半胱氨酸酶法转化制备方法,其特征在于步骤(2)所述的表面活性剂为吐温-80或十六烷基三甲基溴化铵或聚乙二醇辛基苯基醚,其浓度为0.005 g/L~5.0 g/L。
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