[发明专利]氧化双醛纤维素固定化脲酶的制备方法

权利要求书

1.一种氧化双醛纤维素固定化脲酶的制备方法，其特征是按如下步骤进行的：

一、氧化双醛纤维素的制备：

(1)纤维素的活化：将微晶纤维素或棉纤维置于质量比为12％-20％的NaOH水溶液中润涨24h，用蒸馏水洗至中性，抽滤后将得到的固体置于30-40℃烘箱中干燥3h，研磨成粉末备用；

(2)纤维素的氧化：将活化后的微晶纤维素或棉纤维与1∶1-1∶4的重量比的高碘酸或高碘酸钠置于水热合成反应釜中，加入蒸馏水，填充系数为0.6-0.9，将此密闭的水热合成反应釜置于110-130℃烘箱中反应4-10h；反应结束后，滤纸过滤得到固体，并用蒸馏水反复冲洗该固体4-5次，抽滤后将固体置于30-40℃烘箱干燥3h后研磨成粉备用；将干燥得到的产物再进行一次相同方法的选择性氧化反应，即得氧化双醛纤维素，再将氧化双醛纤维素置于30-40℃烘箱中干燥3h后放入4℃冰箱中保存；

二、固定化脲酶的制备：

(1)分散相的制备：取步骤一(2)得到的氧化双醛纤维素载体，加入pH4-10的磷酸盐缓冲液制备分散相；控制氧化双醛纤维素在此分散相中的质量比为3％-5％；

(2)脲酶的固定：向分散相中加入脲酶溶液，其中脲酶溶液浓度为0.1-20mg/mL，控制反应温度2-8℃，磁力搅拌2-4h；

(3)洗涤干燥：用纱布过滤得到固体，将此固体用去离子水洗涤4-5次，除去未固定的游离脲酶，真空冷冻干燥得到固定化的脲酶。