[发明专利]猪瘟、猪伪狂犬病二联疫苗及其制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种猪瘟、猪伪狂犬病二联疫苗，特别是指一种使用特定比例配合的猪瘟、猪伪狂犬病二联疫苗。 

背景技术

猪瘟(Classical Swine fever，简称CSF)，又称为猪霍乱(Hog cholera)或欧洲型猪瘟(European swine fever)，是一种猪只急性或超急性发热的病毒传染性疾病，临床上的特征是散播迅速、发烧，解剖检验时可看到典型的出血病变。猪瘟可感染各种年龄的猪只，一年四季流行，发病率和死亡率均高，对猪只危害极大。本病是威胁养猪业最重要的传染病之一。世界动物卫生组织(OIE)将猪瘟列为A类16种法定传染病之一，中国则定为一类烈性传染病。猪伪狂犬病(Pseudorabies，PR)是多种动物共患的传染病，引起家畜和野生动物急性致死性的传染病，以发热、奇痒和脑脊髓炎为主要症状，猪是其自然易感宿主，主要引起妊娠母猪流产、死胎和木乃伊胎，仔猪感染主要是神经症状，成年猪则以隐性感染为主，该病已成为种猪繁殖障碍综合症的主要病因。 

免疫接种是猪瘟和猪伪狂犬病防制的重要措施，但目前市场上仅有猪瘟活疫苗和猪伪狂犬病活疫苗单苗，为有效预防猪瘟和猪伪狂犬病的发生，需单独免疫上述两种活疫苗。单独免疫猪瘟活疫苗和猪伪狂犬病活疫苗存在繁琐、费时、费力、增加成本等问题，且容易造成漏种，直接影响免疫效果。 

台湾大学赖秀穗做了大量猪瘟兔化弱毒疫苗超前免疫试验，取得了免疫的成功并推广使用。但同时指出，PR可干扰CSF抗体的产生，这种干扰现象是由于PR病毒破坏免疫系统引起的(《家畜传 染病学》【M】北京：农业出版社，1989.428)。1996年，费流芳等(《发生伪狂犬病猪场的猪瘟与伪狂犬病免疫试验》，[J].中国兽医杂志，1996，22(7)：9-10)在发生伪狂犬病的猪场做了猪瘟和伪狂犬的免疫相关试验，也得出了猪场发生PR后，免疫猪瘟疫苗后猪群产生的猪瘟(CSF)抗体整体水平很低的结论。2004年，宁宜宝等做了PPV、PRV、PRRSV 3种非猪瘟病毒单独或混合感染对猪瘟弱毒疫苗免疫效力的影响的试验，结果表明猪场中PPV、PRV、PRRSV非猪瘟病毒的感染可直接干扰猪瘟疫苗的免疫效力，导致猪瘟野毒感染后在免疫猪体内滞留、种猪长期带毒排毒，造成CSFV持续感染(《3种非猪瘟病毒单独或混合感染对猪瘟弱毒疫苗免疫效力的影响》，[J].2004，24(2)：112-114)。中国专利CN 101690808A虽然也尝试使用猪瘟、伪狂犬病二联疫苗，但所述二联疫苗至少需要每头份含CSF病毒大于500,000个家兔感染量，PRV大于10⁸TCID₅₀，需要制备大量的高滴度病毒液，其商业利用可能性很小，而且对该二联疫苗的对猪攻毒的免疫效果和PR的毒种来源并没有描述。硕士论文《猪瘟和猪伪狂犬病二联苗免疫干扰现象的研究》(贺卫洁，2010年)也发现了PR对CSF抗原的抑制作用，不仅干扰CSF的前期抗体，而且二联苗的免疫峰值也比单苗的低。作者虽然也配制了一种猪瘟和猪伪狂犬病二联苗，但为了克服二种抗原之间的干扰，还需要加入转移因子，其本身有一定的副作用，不利于在生产实践中应用。因此，虽然一直以来人们希望获得安全可靠、免疫效果良好的猪瘟和猪伪狂犬病二联苗，但由于二种抗原之间的干扰，至今还未能见到符合要求、适合工业化生产的猪瘟和猪伪狂犬病二联疫苗。 

发明内容

有鉴于此，本发明的主要目的在于提供一种猪瘟、猪伪狂犬病二联疫苗，其中二种抗原之间具有适合的形式和比例，以获得抗原配合良好、免疫效果优异、甚至二种抗原可以相互促进的二联疫苗，简言之，本发明的主要目的在于提供一种相对于单苗而言，提高免疫效果的猪瘟、猪伪狂犬病二联疫苗。 

技术方案

优选地，本发明所述的猪瘟、猪伪狂犬病二联疫苗，为包含至少一种猪瘟病毒抗原、至少一种猪伪狂犬病毒抗原的二联疫苗。 

优选地，本发明所述的猪瘟、猪伪狂犬病二联疫苗中，所述的猪瘟病毒抗原为猪瘟活病毒、改良/嵌合的猪瘟活病毒、至少含有猪瘟病毒的免疫原性氨基酸序列的重组病毒，至少含有猪瘟病毒的免疫原性氨基酸序列的多肽或成分的一种或任意几种的组合。更优选地，本发明所述的猪瘟、猪伪狂犬病二联疫苗中，所述的猪瘟病毒抗原为猪瘟兔化弱毒株；更优选地，所述的猪瘟病毒抗原为猪瘟病毒E2亚单位抗原。