[发明专利]从橄榄叶中提取羟基酪醇的方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物中活性成分的提取方法，具体涉及从橄榄叶中提取羟基酪醇的方法。

背景技术

羟基酪醇（Hydroxytyrosol）化学名为3,4-二羟基苯乙醇，是一种多酚类物质，分子式C₈H₁₀O₃，相对分子量154。

羟基酪醇有着安全卓越的抗氧化能力以及抗菌、抗癌、抗炎等多种生物和药理活性，可以促进骨骼发育，还可以预防心脑血管疾病。在抗氧化方面：能促进新陈代谢，促进伤口愈合，消除体内自由基，恢复人体脏腑器官的健康状态，防止脑衰，延缓衰老，保持青春活力；还可以保护人体视网膜上皮细胞，防治和治疗视网膜黄斑病，保护视力。在促进骨骼发育方面：有助于人体对矿物质的吸收，无需补钙，自然吸收，保持骨密度，减少骨骼疏松和促进骨骼发育。在抗菌方面：发现羟基酪醇对革兰氏阴性菌显出很强的抑菌性，主要是通过穿透革兰氏阴性菌的细胞黏膜，分解细菌的黏肽，或者引发细菌黏膜的破损。在心脑血管疾病和抗炎方面，能抑制血小板聚集和血栓素的产生，降低动脉粥样硬化疾病的发生；还能够抑制白血细胞的增殖，并诱导其凋亡，从而达到抗炎的效果。

羟基酪醇最初来源于油橄榄中，是橄榄中的一种次生代谢物，游离的羟基酪醇很少，在橄榄中主要以橄榄苦甙的形式存在，可由橄榄苦甙分解而得到。橄榄中各个部位都含有橄榄苦甙，在干燥的橄榄叶中可达到2%～10%。目前羟基酪醇主要是从橄榄果、叶以及在制备橄榄油过程中产生的残渣和废水中分离得到；而羟基酪醇的纯化主要采用柱色谱分离的方法，如硅胶柱、离子交换树脂。如公开号为CN101631758的发明专利，公开了一种煮沸水解制备羟基酪醇的方法，首先用水或有机溶剂对原料的提取部位进行煎煮、冷浸、回流、渗漉或超声提取，水或有机溶剂的质量为原料提取部位的6～10倍，提取1～3次，每次30～90min，合并提取液，浓缩至相对密度为1.0～1.3，得到植物提取液；调节植物提取液的pH为1～3，然后常压下煮沸水解1～4h；放凉后调节其pH为6.8～7.2，过滤，取上清液上样于大孔吸附树脂，吸附完成之后先用水冲洗除杂，然后用体积分数10～90%的甲醇或乙醇进行洗脱，收集洗脱液；浓缩回收甲醇或乙醇，得到羟基酪醇提取物。该发明所述方法克服了使用酸液上柱、酸液洗脱，会对树脂设备产生腐蚀的不足，但该方法中提取和水解步骤分开进行，且提取之后需要调节提取液的pH为1～3后再进行水解，工艺较为繁索；此外，该方法所得产品的纯度不高。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种工艺简单、提取和水解同步进行且所得产品纯度高的从橄榄叶中提取羟基酪醇的方法。

为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：

从橄榄叶中提取羟基酪醇的方法，它是以橄榄叶为原料，用pH=11～14的碱液于80～100℃条件下保温提取，所得提取液浓缩，过大孔吸附树脂柱，用甲醇或乙醇洗柱，薄层层析跟踪检测，收集含目标成分的醇洗脱液；将醇洗脱液浓缩，用萃取剂萃取，收集萃取相，浓缩，干燥，得到羟基酪醇。

为了减少提取液对树脂设备的腐蚀，最好是先将提取液的pH值调至6～7后再浓缩，由于浓缩后的浓缩液中会有一定量的固形物产生，为了减少树脂被堵塞的机率，浓缩后最好先进行过滤或离心，所得滤液或上清液再过大孔树脂柱；因此，更为优选的从橄榄叶中提取羟基酪醇的方法，包括以下步骤：

1)以橄榄叶为原料，用pH=11～14的碱液于80～100℃条件下保温提取1～3次，每次3～8h，过滤，合并滤液，得到提取液；

2)用酸调节提取液的pH值至6～7，浓缩，过滤或离心，滤液或上清液过大孔吸附树脂柱，先用水洗柱，再用甲醇或乙醇洗柱，薄层层析跟踪检测，收集含目标成分的醇洗脱液，

3)将所得醇洗脱液浓缩，用萃取剂萃取，收集萃取相，浓缩，干燥，得到羟基酪醇。

上述方法中：

步骤1)中，优选是用pH=11～12的碱液对橄榄叶进行提取。该步骤中，进行浸提前，最好是将橄榄叶进行粉碎以提高后序浸提工序中的提取率，粉碎的粒度通常为10～30目。本申请中所述的橄榄叶为木犀科木犀榄属油橄榄树（Olea europaea L）的叶子。

步骤1)中，所述的碱液可以是氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、碳酸钠或碳酸氢钠的水溶液；每次提取时碱液的用量通常为原料重量的3～10倍。

步骤2)中，调节提取液pH值的酸可以是盐酸、硫酸或醋酸等其它有机酸或无机酸。提取液调节pH值后先浓缩至1～3波美，然后再过滤或离心。