[发明专利]化合物在生物合成核酸以增加细菌培养物的产率中的应用

权利要求书

1.通气和高光学密度条件下发酵，获得增加产率的乳酸菌培养物的方法，该方法包括以下步骤：

i)在培养介质中于一定条件下培育乳酸菌，使得发酵进行到在600nm测定的光学密度(OD₆₀₀)为10，其中所述培养介质包含至少一种卟啉化合物和至少一种产率增加剂，所述产率增加剂选自由嘌呤碱基、嘧啶碱基、核苷、核苷酸和它们的衍生物组成的组，其浓度为确保在发酵结束时培养介质含有至少1μM的所述至少一种产率增加剂，其中所述衍生物选自5-甲基胞嘧啶(^MeC)、异胞嘧啶、假异胞嘧啶、5-溴尿嘧啶、5-丙炔基尿嘧啶、5-丙炔-6-氟尿嘧啶、5-甲基噻唑尿嘧啶、6-氨基嘌呤、2-氨基嘌呤、2，6-二氨基嘌呤、7-丙炔-7-去氮腺嘌呤、7-丙炔-7-去氮鸟嘌呤和2-氯-6-氨基嘌呤；以及

ii)收集所述乳酸菌以获得乳酸菌培养物，

其中，与在相同条件下和在含有少于1μM的各产率增加剂的相似介质中来培养微生物相比，在发酵结束时产率增加剂增加了收集到的乳酸菌的产率。

2.根据权利要求1的方法，其中，所述培养介质最初含有至少1mM的至少一种产率增加剂，其选自由一种或多种用于核酸的生物合成中的化合物或者由任何这样的化合物的一种或多种衍生物所组成的组，其中所述衍生物选自5-甲基胞嘧啶(^MeC)、异胞嘧啶、假异胞嘧啶、5-溴尿嘧啶、5-丙炔基尿嘧啶、5-丙炔-6-氟尿嘧啶、5-甲基噻唑尿嘧啶、6-氨基嘌呤、2-氨基嘌呤、2，6-二氨基嘌呤、7-丙炔-7-去氮腺嘌呤、7-丙炔-7-去氮鸟嘌呤和2-氯-6-氨基嘌呤。

3.根据前述任意一项权利要求的方法，其中，所述培养介质是复合物发酵介质，向每升该介质中加入至少0.2g的至少一种产率增加剂。

4.根据权利要求1的方法，其中，所述至少一种产率增加剂是在发酵过程中加入的。

5.根据权利要求1的方法，其中，所述高光学密度的条件的特征是在发酵结束时OD₆₀₀高于15。

6.根据权利要求1的方法，其中，所述产率增加至少1.2倍。

7.根据权利要求1的方法，其中，所述产率增加剂是嘌呤碱基，该嘌呤碱基选自由腺嘌呤、鸟嘌呤、黄嘌呤和次黄嘌呤组成的组。

8.根据权利要求1的方法，其中，所述产率增加剂是嘧啶碱基。

9.根据权利要求8的方法，其中，所述嘧啶碱基是选自由胞嘧啶、胸腺嘧啶和尿嘧啶组成的组。

10.根据权利要求1的方法，其中，所述产率增加剂是核苷。

11.根据权利要求10的方法，其中，所述核苷是选自由腺苷、鸟苷、尿苷、胞苷、肌苷、脱氧腺苷、脱氧鸟苷、脱氧胸苷、脱氧胞苷和脱氧肌苷组成的组。

12.根据权利要求11的方法，其中，所述核苷是选自由腺苷、鸟苷、尿苷、胞苷和肌苷组成的组。

13.根据权利要求12的方法，其中，所述核苷是肌苷。

14.根据权利要求1的方法，其中，所述产率增加剂是核苷酸。

15.根据权利要求14的方法，其中，所述核苷酸是选自由腺苷单磷酸(AMP)、鸟苷单磷酸(GMP)、尿苷单磷酸(UMP)、胞苷单磷酸(CMP)、黄嘌呤单磷酸(XMP)、肌苷单磷酸(IMP)、脱氧腺苷单磷酸(dAMP)、脱氧鸟苷单磷酸(dGMP)、脱氧胸苷单磷酸(dTMP)、脱氧胞苷单磷酸(dCMP)、脱氧黄嘌呤单磷酸(dXMP)和脱氧肌苷单磷酸(dIMP)组成的组。

16.根据权利要求15的方法，其中，所述核苷酸是选自由AMP、GMP、UMP、CMP、XMP和IMP组成的组。

17.根据权利要求16的方法，其中，所述核苷酸是IMP。