[发明专利]一株降解石油污染物的红球菌JZX-01及其培养方法无效
申请号: | 201210198948.3 | 申请日: | 2012-06-15 |
公开(公告)号: | CN102851234A | 公开(公告)日: | 2013-01-02 |
发明(设计)人: | 贾晓强;周征西;闻建平 | 申请(专利权)人: | 天津大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A62D3/02;C12R1/01;A62D101/20 |
代理公司: | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人: | 王丽 |
地址: | 300072 天*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 降解 石油 污染物 球菌 jzx 01 及其 培养 方法 | ||
1.一种红球菌JZX-01,其特征是由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏的登记号为CGMCC No.5958的红球菌;保藏日期2012年4月9日。
2.一种如权利要求1所述的红球菌JZX-01的培养方法,其特征是步骤如下:
(1)红球菌JZX-01菌体或者孢子接到斜面上,在斜面上培养1-4天,所述的培养基成分是碳源1-20g/L,氮源1-5g/L、NaCl 1-2g/L、微量元素混合溶液溶液1-20mL/L、琼脂1-30g/L、磷酸根的一价金属离子或者其水合物1-5g/L、磷酸二氢的一价金属盐或其水合物1-5g/L,加蒸馏水定容至1L。
(2)将菌体从斜面上取得后,转接到培养液中培养1-4天,所述的培养液的成分是:氮源1-5g/L、NaCl 1-2g/L、微量元素溶液1-20mL/L、磷酸根的一价金属离子或者其水合物1-5g/L、磷酸二氢的一价金属盐或其水合物1-5g/L,诱导剂1-10ML/L,加蒸馏水定容至1L,pH值是3-9,培养温度是5℃-45℃。
3.一种红球菌JZX-01,其特征是通过16S rDNA测序以及在NCBI上进行比对得到的,上游和下游引物都是通用引物,上游引物是27F,具体的序列是5’-AGAGTT TGA TCC TGG CTC AG-3’,下游引物是1492R,具体的序列是5’-GGT TAC CTTGTT ACG ACT T-3’。
4.如权利要求3所述的培养方法,其特征是所述的碳源是为可溶性淀粉、葡萄糖或者甘油。
5.如权利要求3所述的培养方法,其特征是所述的氮源是牛肉膏、牛肉浸取物、蛋白胨、酵母提取物、黄豆粉浸液、L-谷氨酸氨、硫酸铵、氯化铵、硝酸钠或硝酸钾。
6.如权利要求3所述的培养方法,其特征是所述的微量元素是锰、锌、钴、镍、镁、铁、钙、铜、铬、硒、钼、钴或氟。
7.如权利要求3所述的培养方法,其特征是所述的诱导剂添加到培养基或培养液中作为JZX-01的唯一碳源进行培养,保证菌种只能利用此种碳源进行生长代谢;所述的诱导剂是烷烃、原油、柴油、汽油、液态石蜡或多环芳烃。
8.如权利要求3所述的培养方法,其特征是培养14天后的培养液在转速1000-10000rpm,温度0-20℃下进行离心1-10分钟。
9.如权利要求3所述的培养方法,其特征是所述的离心后的到的菌体JZX-01用不含碳源的无机盐培养基洗涤1-3次,除去培养基中的营养物质,将纯净的JZX-01加入到培养基中进行培养。
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