[发明专利]青霉素在葡萄试管简易繁殖上的应用及葡萄试管繁殖新技术

说明书

技术领域

本发明属于农业生物技术领域，特别是涉及一种青霉素在葡萄试管简易繁殖上的应用及葡萄试管繁殖新技术。

背景技术

葡萄试管脱毒繁殖是一项最有成效的生物技术，一个脱毒或新育良种和稀缺葡萄品种用试管繁殖能在短期内快速大量提供整齐一致的无病毒葡萄苗木，但试管繁殖需要具备一定的设备和技术手段，成本高(含糖琼脂培养基成本是常规繁殖的4-8倍)(见曹效东、曹孜义，1996，植物试管繁殖的成本与效益浅析。植物生理学通讯，32(4)，284-291)；在含糖琼脂培养基上容易滋生微生物，造成污染；试管苗根无根毛，移栽不易(表6)；含糖琼脂培养基耗电大、用工多，费用高(见表5)。若采用只加有无机营养成分的简易蛭石培养基，则杂菌无法生长，培养基简单，省工、省电，且可大幅降低成本，但是该蛭石培养基中没有有机成分和生长素，导致葡萄试管苗生根较慢，加入青霉素有促进生根作用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种青霉素在葡萄试管简易繁殖上的应用；

本发明的另一个目的是提供一种工艺简便，成本低廉，不易污染，同时既能防治杂菌，又可有效地促进生长和生根的葡萄试管繁殖新技术。

为实现上述发明目的所采用的技术方案为：

一种青霉素在葡萄试管简易繁殖上的应用。

一种葡萄试管简易繁殖新技术，其特征是：将从田间选取的葡萄脱病毒优良植株，采用综合无伤消毒技术获取无菌苗，然后在GS琼脂培养基上，在25-28℃、1500-3000Lx光照条件下进行初代培养，至试管苗长至瓶口时，剪成单芽茎段转入另瓶GS琼脂培养基中进行继代培养，在移栽前2月用加入低浓度青霉素的GN营养液+蛭石培养基，在25-28℃、1500-3000Lx光照条件下培养18-20天，长成苗即可进行移栽。

所述的青霉素、蛭石和GN营养液的用量配比为：每80-90mlGN营养液中加入50-60g蛭石和25-50mg的青霉素；

其中GN营养液组成为每1L水中含有如下mg的物质：

本发明采用含有低浓度青霉素的蛭石培养基进行葡萄试管简易繁殖，具有如下技术优势：

1、成本低，青霉素蛭石培养基是琼脂培养基成木的1/4(琼脂180元/kg斤，蛭石150元/m³)。

2、青霉素蛭石培养基，因没有糖和有机成份，不易兹生杂菌(见表4)。

3、受不良条件影响的葡萄琼脂培养基试管苗，可以用青霉素蛭石培养基进行挽救，从而减少损失(见表3)。

4、青霉素蛭石培养基透气好，葡萄试管苗根上有根毛，吸收好，移栽较易(表1、2、6)。

5、青霉素蛭石培养基，容器和水不用严格清洗，简少工序，节省用工、用电和设备。

6、青霉素蛭石培养基葡萄试管苗，繁殖速度是原有方法的1.5倍。

综上所述，本发明工艺简便，成本低廉，不易污染，同时既能防治杂菌，又可有效、快速地促进葡萄生长和生根，加快繁殖速度。本发明对于快速高效的繁殖脱毒葡萄、新育良种和稀缺葡萄品种迅速、低成本的繁殖推广有重要意义。

附图说明

图1为初代长成的无苗葡萄试管苗；

图2为加青霉素的蛭石培养基繁殖20天生长情况；

图3为光培开瓶后2D，简易蛭石试管繁殖苗(前排)与琼脂繁殖试管苗(后排)的生长情况；

图4为蛭石试管苗根有根毛，容易移栽；

图5为琼脂三角瓶试管苗根无根毛，不易移栽；

图6为沙培炼苗后葡萄试管苗根多根壮。

具体实施方式

1、无菌脱毒良种葡萄试管苗的获得：

从田间选取的葡萄脱病毒优良植株，采用综合无伤消毒技术获取无菌苗，然后在GS琼脂培养基上，在25-28℃、1500-3000Lx光照条件下进行初代培养，具体过程为：

1)用无菌操作技术剪取嫩梢，放入无菌的广口瓶内。

2)先用无菌水冲洗1-2次。

3)倒入清洁剂(84消毒液，浓度按说明书)摇洗15分钟，无菌水冲洗2次，倒入70％酒精迅速过一下，不超过5秒钟，去酒精，无菌水浸泡和冲洗2次。

4)去无菌水，加入0.1％升汞(内加2％的95％酒精)，浸没材料，并剧烈摇动3～8分钟(根据材料老幼变动，嫩的短，老的长)，去升汞，无菌水冲四次备用。