[发明专利]双信号独立的嵌合抗原受体及其用途

说明书

本发明涉及一种嵌合抗原受体（CAR），特别是双信号独立的嵌合抗原受体，还涉及表达所述CAR的免疫反应细胞，以及所述免疫反应细胞用于制备治疗恶性肿瘤及病毒感染性疾病的药物中的用途。具体地，所述双信号独立的CAR分别识别肿瘤细胞两个不同家族的抗原，分别传递T细胞活化相关的两种信号。其中一种CAR通过结合肿瘤特异性抗原或肿瘤相关抗原的配体传递T细胞活化相关的第一信号，决定T细胞杀伤特异性；另一种CAR通过结合肿瘤细胞广泛表达的膜受体（如EGFR家族成员蛋白）的配体传递T细胞活化相关的第二信号，促进T细胞活化、增殖与存活。本发明能在保持第二代、第三代CAR疗效的基础上，避免其潜在的安全问题。

技术领域

本发明涉及一种嵌合抗原受体，特别是双信号独立的嵌合抗原受体，本发明还涉及表达所述嵌合抗原受体的免疫反应细胞，以及所述免疫反应细胞用于制备治疗恶性肿瘤及病毒感染性疾病的药物中的用途。

背景技术

肿瘤过继细胞治疗（adoptive cell therapy,ACT）是将经处理的自体或异体免疫细胞（主要是自体细胞）回输给肿瘤患者，以增强患者免疫功能，达到治疗目的的方法。当前肿瘤ACT进展迅速，利用肿瘤浸润淋巴细胞（tumor-infiltrating lymphocyte,TIL）开展的过继免疫治疗方案针对黑色素瘤取得了非常好的临床效果（Science 2002;298:850-4）。然而，T细胞活化需要两个信号的刺激，即两种T细胞活化相关信号。其中，T细胞表面TCR-CD3复合体与抗原肽-MHC分子结合，提供T细胞活化的第一信号，决定T细胞的杀伤特异性；T细胞表面的共刺激分子（如CD28）与相应配体（如B7）结合，提供T细胞活化的第二信号，促进T细胞活化、增殖与存活。但肿瘤细胞第一信号刺激源（如MHC分子）与第二信号配体（如B7）等缺乏或表达下降，无法有效提供T细胞活化相关的信号，从而激活T细胞免疫反应。因而，需要对T细胞进行基因改造。目前主要通过转基因TCR（T cell receptor）及嵌合抗原受体CAR（chimeric antigen receptors,CAR）两种方式来实现这种T细胞的基因改造（Blood 2010;116:1035-44；Nat Rev Clin Oncol 2011;8:577-85）。

TCR改造具有比较大的限制性，①转基因TCR链可能与病人的内源性的TCR链发生错配，从而导致T细胞表面肿瘤反应性的TCR密度减少；②TCR识别MHC分子递呈的抗原，但不同的病人MHC分子是不同的，所以必须分离对所有MHC单体型特异的TCR，可操作性低；③大部分TCR不能识别糖类或糖脂类抗原，抗原选择范围较窄；④只提供T细胞活化相关的第一信号，没有提供第二信号，疗效不足。因而，嵌合抗原受体CAR受体受到更多的青睐。