[发明专利]一种果蔬组织及其相关制品中还原型抗坏血酸和异抗坏血酸的分离测量的方法

权利要求书

1.一种果蔬组织及其相关制品中还原性抗坏血酸和异抗坏血酸的分离测量的方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)备料：以新鲜的果蔬组织或其制品为原料，在液氮中研磨成匀浆；

(2)提取：以料液比1:5-10的比例加入提取还原液，35-40℃提取60分钟，得到含有抗坏血酸提取液，提取液经过离心机以5000r/min的速度进行固液分离，获得上清液；残渣用相同的条件重复提取一次，合并两次上清液；

(3)上清液用0.45微米尼龙膜过滤，过滤液作为色谱分析的待测样品；

(4)取5-10μL的上述样品上色谱柱进行分离测量，色谱条件是：采用TSKgel-Amide-80色谱柱，流动相为B相:乙睛和A相:0.1%的酸溶液，梯度洗脱条件：0-7min B相:A相体积比为90:10，7-8min B相:A相体积比为20:80，8-13min B相:A相体积比为20:80，13-14min B相:A相体积比为90:10，14-20min B相:A相体积比为90:10；流速为0.6-0.8mL/min，柱温为25-30℃，检测波长为244nm；

（5）利用外标法根据标准曲线计算样品还原性抗坏血酸和异抗坏血酸的含量。

2.根据权利要求1所述的一种果蔬组织及其相关制品中抗坏血酸和异抗坏血酸的分离测量的方法，其特征在于步骤(2)中所述的提取还原液由4-7%偏磷酸，2mM磷酸三-(β-氯乙基)酯和2mM乙二铵四乙酸钠组成。

3.根据权利要求1所述的一种果蔬组织及其相关制品中抗坏血酸和异抗坏血酸的分离测量的方法，其特征在于步骤(4)所述的0.1%的酸溶液所用的酸为甲酸、乙酸或三氟乙酸。