[发明专利]一种从下垂长叶暗罗中提取考拉维酸的方法

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及一种从下垂长叶暗罗中提取考拉维酸的方法。

背景技术

考拉维酸是一种二萜类化合物，分子式为C₂₀H₃₂O₂，分子量为304.47，主要存在于番荔枝科(Annonaceae)下垂长叶暗罗的茎皮中，资源丰富。药理研究表明，考拉维酸具有细胞毒活性，对Crown gall tumors有显著抑制作用，对三种人型肿瘤细胞株(A-549肺癌、MCF-7乳癌、HT-29结肠腺癌)有明显的细胞毒活性；具有抗菌活性，对革兰阳性菌(枯草杆菌和金黄色葡萄球菌)有强的抑制作用；具有拒食活性。在1%浓度时，对地下白蚁有强的拒食活性。

目前，对考拉维酸的研究较少，经检索，尚未发现大量制备考拉维酸的工业化方法的公开报道。

发明内容

针对上述情况，本发明的目的是提供一种从下垂长叶暗罗中提取考拉维酸的方法。

本发明是通过如下技术方案实现的：

一种从下垂长叶暗罗中提取考拉维酸的方法，其特征在于包括以下步骤：将下垂长叶暗罗茎皮粉碎，投入萃取釜，通入处于超临界状态的CO₂进行萃取，获得油状萃取物，将萃取物用乙醚萃取多次，所得萃取液浓缩后得乙醚浸膏，将乙醚浸膏加入氧化镁柱层析，正己烷-乙醚梯度洗脱，洗脱液旋转蒸发浓缩，干燥即得考拉维酸粗品，用制备高效液相分离得到考拉维酸，纯度达98%以上。

所述超临界CO₂萃取温度为35-60℃，萃取压力为20-35MPa，时间为1-3h，通入CO₂流量为15-22L/h，以乙醇为夹带剂，夹带剂的用量为药材重量的5-15%。

所述氧化镁柱径高比为1:8-15，正己烷-乙醚混合溶剂体积比为1:1-7。

所述高效液相色潽法流动相为甲醇-0.8%醋酸-四氢呋喃，体积比为480-510:100-120:1，流速20-50ml/min，检测波长237nm。

本发明的有益效果是：采用超临界CO₂萃取，可实现连续提取，同时浓缩提取液，既节约溶剂，又提高了萃取率；采用反相高效液相色潽法精制纯化，纯度高达98%以上，所得产品可作为对照品使用，同时可进行大量制备；本发明工艺稳定，可用于工业化生产。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明进行进一步说明。

实施例1：

将下垂长叶暗罗茎皮粉碎，称取1000g，投入萃取釜中，通入处于超临界状态的CO₂进行萃取，设定萃取釜参数：萃取温度38℃，压力为20MPa，通入CO₂流量为18L/h，待萃取罐内环境稳定后，通入50ml乙醇作为夹带剂参与萃取，萃取2h后从分离釜中收集油状萃取物，将萃取物用乙醚反复萃取4次，合并乙醚萃取液，浓缩后得到乙醚浸膏。将乙醚浸膏与适量氧化镁混合拌匀，用浸膏5倍量的氧化镁装柱（柱径高比1:10），将拌样氧化镁置于柱顶，用正己烷-乙醚按体积比1:1、1:3、1:7进行梯度洗脱，薄层跟踪监测，收集考拉维酸的流分，旋转蒸发浓缩，干燥得考拉维酸粗品。将考拉维酸粗品用甲醇溶解，0.45μm微孔滤膜滤过，经制备高效液相色谱分离，流动相为甲醇-0.8%醋酸-四氢呋喃，体积比为510:120:1，流速25ml/min，以紫外检测器检测指导产品收集，检测波长237nm，连续进样，收集含有考拉维酸的高纯度流分，浓缩干燥得产品3.1g，含量为98.6%。

实施例2：