[发明专利]hrEGF修饰的载顺铂高分子纳米粒、制备及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物医药技术和纳米医药领域的药品及其制备方法，具体是一种主动靶向性hrEGF修饰的载顺铂高分子纳米粒、制备及其应用。

背景技术

卵巢癌是妇科肿瘤中恶性程度最高的疾病，居妇科恶性肿瘤死亡率首位，严重威胁着女性的生殖健康。卵巢癌发病隐匿，极易发生侵袭和远处转移，约70%～80%的卵巢癌患者诊断时即属于Ⅲ/Ⅳ期，其五年生存率仅为30%左右。卵巢癌的治疗以彻底的肿瘤减灭术为主，但由于其转移方式多表现为腹腔内散在的广泛种植，故依靠手术彻底切除肿瘤尚不可能，残存的散在肿瘤结节，必须依靠手术后的化疗。

最常用的是以铂类为主的一线联合化疗方案。但因化疗药物缺乏选择性且具有毒性反应，它在杀死肿瘤细胞的同时往往也杀死了正常的细胞，导致患者出现骨髓抑制、肾功能不全、消化道反应、心脏传导障碍等情况，生活质量严重下降，一些患者甚至因化疗引起的感染及出血等并发症而死亡。致使药物利用度有限，使用剂量受限。此外，还有一些年老体弱或有心、肝、肾功能不全的患者无法耐受化疗的毒性反应而不能进行化疗，导致卵巢癌迅速进展而死亡。因此，需要一种有效的靶向给药系统使药物到达肿瘤区。这种系统不仅可以提高药物在肿瘤区的浓度，更有效地杀伤肿瘤细胞，而且可以减小对正常细胞、组织的损害。

纳米粒作为靶向性制剂载体已成为国内外研究的热点，通过载药纳米粒载体将治疗药物靶向地导向病灶部位，可以达到精密化给药的目的，而又对非靶组织、器官、细胞的影响很少。近年来的研究发现，将纳米粒与具有特异肿瘤靶向的活性分子或特殊基团相连，可使之具备肿瘤特异靶向功能，从而在很大程度上提高了肿瘤细胞内的药物浓度。已知肿瘤的发生、发展是由细胞信号网络调控的多基因参与的极其复杂的过程,表皮生长因子受体（EGFR）信号通路在正常组织中多呈关闭状态,而在肿瘤组织中被激活开放,而且其活跃程度与肿瘤病情进展呈正相关。段友容等人报道了聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸-聚赖氨酸（简称mPEG-PLGA-PLL）纳米递送系统、制备方法及其应用（CN 200910247576.7，Liu P.F，Biomaterials，2012，33：4403-4412）为包载活性药物提供了可能。本发明人和国内外的许多研究均提示人卵巢癌组织和细胞株中高表达EGFR。本发明人利用EGFR的配体EGF修饰载药的纳米粒载体，无疑将使细胞膜表面高表达EGFR的卵巢癌细胞的药物摄取量增加，从而使药物特异性作用于卵巢癌细胞，发挥药效，实现靶向治疗。

发明内容

本发明的目的是针对现有临床中的问题，提供一种hrEGF修饰的载顺铂mPEG-PLGA-PLL纳米粒，是具有特异性靶向和主动靶向性、EGFR高表达的卵巢癌肿瘤细胞的载顺铂高分子纳米粒，使包裹的顺铂在血液中能长效循环、对卵巢癌组织具有双重靶向性、释药速率可调，以期最大限度的提高疗效、降低其毒副作用。所述的所述的高分子载体是即聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸-聚赖氨酸，简称mPEG-PLGA-PLL；所述的hrEGF表示人重组表皮生长因子。

本发明的目的还提供一种上述hrEGF修饰的载顺铂mPEG-PLGA-PLL纳米粒的制备方法。

本发明的另一目的是提供一种上述hrEGF修饰的载顺铂mPEG-PLGA-PLL纳米粒在制备抗肿瘤药物中的应用，尤其在制备抗卵巢癌药物中的应用。

为了达到以上目的，本发明的hrEGF修饰的载顺铂mPEG-PLGA-PLL纳米粒是hrEGF与mPEG-PLGA-PLL纳米粒表面的氨基进行连接，在纳米粒中包裹顺铂药物。所述的高分子载体是mPEG-PLGA-PLL。

本发明选择的高分子材料mPEG-PLGA-PLL,具有良好的生物相容性及降解性，安全无毒。

本发明提供的hrEGF修饰的载顺铂mPEG-PLGA-PLL纳米粒，粒径在25-500nm；优选100～200nm之间；所述的纳米粒粒径为多数分散指数PDI在0.25～1之间；再加上EGFR靶向及mPEG化，可以有效减少网状内皮系统(RES)吞噬，延长循环时间，提高药物制剂的靶向性。所述的mPEG化表示连接单甲醚聚乙二醇。

本发明提供的hrEGF修饰的载顺铂mPEG-PLGA-PLL纳米粒的制备方法，包括以下步骤：

（1）采用超声乳化和溶剂挥发法制备载顺铂高分子纳米粒：

将的mPEG-PLGA-PLL溶解在极性有机溶剂中构成有机相，取顺铂溶液作为水相，将顺铂溶液加入到有机相中，200～400w超声1～5min，乳化均匀形成初乳；