[发明专利]一种马槟榔愈伤组织的诱导及再生方法

权利要求书

1.一种马槟榔愈伤组织的诱导及再生方法，其特征是含以下步骤：

(1)材料的选取与消毒选取马槟榔材料，将材料经含清洗和浸泡消毒工序处理，获得处理后的马槟榔材料；

(2)愈伤组织诱导将处理后的马槟榔材料切块，获得组织块，将组织块接种于愈伤组织诱导培养基上于26~28℃进行暗培养20~60天，获得马槟榔愈伤组织块；

(3)丛生芽诱导将马槟榔愈伤组织块连同马槟榔愈伤组织块中未愈伤的组织块，转接于丛生芽的诱导培养基上于26～28℃进行光培养20~40天，获得马槟榔丛生芽组织块；

(4)丛生芽的增殖培养：选取长势较好的马槟榔丛生芽组织块进行切块，去除已死去变黑和变褐的组织，接种于丛生芽增殖培养基上于26～28℃进行光培养30~60天，获得大量的马槟榔不定芽；

(5)不定芽的生根成苗：选取马槟榔不定芽接到生根成苗培养基上于26～28℃进行光培养30～60天，获得马槟榔的小苗。

2.根据权利要求1所述的马槟榔愈伤组织的诱导及再生方法，其特征是：步骤(1)中所述的马槟榔材料包括马槟榔未成熟胚、成熟胚、嫩茎和嫩叶材料中的一种或几种。

3.根据权利要求1所述的马槟榔愈伤组织的诱导及再生方法，其特征是：步骤(1)中将马槟榔材料经含清洗和浸泡消毒工序处理的过程如下：选取马槟榔材料，用水清洗干净，将马槟榔材料置于体积百分含量为70~75%的酒精中消毒10~60s，并在质量百分含量为0.1%的氯化汞中浸泡消毒3~20min，用无菌水冲洗干净即可，浸泡期间进行不时振荡，使马槟榔材料与酒精或氯化汞充分接触。

4.根据权利要求1所述的马槟榔愈伤组织的诱导及再生方法，其特征是：步骤(2)中将处理后的马槟榔材料切块，获得长度为1.0~2.0cm的组织块。

5.根据权利要求1所述的马槟榔愈伤组织的诱导及再生方法，其特征是：步骤(2)中愈伤组织诱导培养基以MS培养基为基础培养基，在每1升MS培养基中还添加有1~5mg的6-BA、0.1~0.5mg的NAA和20~30g的蔗糖。

6.根据权利要求1所述的马槟榔愈伤组织的诱导及再生方法，其特征是：步骤(3)、步骤（4）和步骤（5）中光培养时，每天光照的时间为10~12h。

7.根据权利要求1所述的马槟榔愈伤组织的诱导及再生方法，其特征是：步骤(3)中的丛生芽诱导培养基和步骤(4)中的丛生芽增殖培养基以MS培养基为基础培养基，在每1升MS培养基中还添加有1~5mg的6-BA、0.1~1.0mg的NAA和20~30g的蔗糖。

8.根据权利要求1所述的马槟榔愈伤组织的诱导及再生方法，其特征是：步骤(4)中选取长势较好的马槟榔丛生芽组织块进行切块至马槟榔丛生芽组织块的大小为0.5~1.5cm²。

9.根据权利要求1所述的马槟榔愈伤组织的诱导及再生方法，其特征是：步骤(5)中所述的生根成苗培养基以MS培养基为基础培养基，在每1升MS培养基中还添加有0.05～0.7mg的IBA以及20~30g的蔗糖。