[发明专利]一种清毒安肾胶囊指纹图谱的建立方法及其应用

权利要求书

1.一种清毒安肾胶囊指纹图谱的建立方法，该建立方法包括以下步骤：

（1）将清毒安肾胶囊的内容物溶于70%体积比的乙醇水溶液，制成浓度为5mg/ml的供试品溶液；

（2）采用高效液相色谱-质谱联用仪检测供试品溶液，获得总离子流图谱；其中，所述高效液相色谱检测采用C₁₈反相键合硅胶色谱柱，流动相1和流动相2进行梯度洗脱，并以电喷雾检测器检测，所述流动相1为0.1%（体积比）的甲酸水溶液，流动相2为0.1%（体积比）的甲酸乙腈溶液，按体积百分比计，所述洗脱梯度如下：

0-0.5分钟，流动相1为95%，流动相2为5%；

0.5-3分钟，流动相1由95%匀速变为80%，流动相2由5%匀速变为20%；

3-13分钟，流动相1由80%匀速变为60%，流动相2由20%匀速变为40%；

13-18分钟，流动相1由60%匀速变为0，流动相2由40%匀速变为100%；

18-20分钟，流动相1为0，流动相2为100%。

2.一种清毒安肾胶囊有效成分的检测方法，该检测方法包括以下步骤：

（1）将清毒安肾胶囊的内容物溶于70%（体积比）的乙醇水溶液，制成浓度为5mg/ml的供试品溶液；

（2）将芍药苷、淫羊藿苷、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd、阿魏酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、黄芪甲苷、大黄酸和大黄素溶于甲醇制备对照品溶液，各组分浓度均为0.02mg/ml；

（3）采用高效液相色谱-质谱联用仪分别检测供试品溶液和对照品溶液，获得总离子流图谱；其中，所述高效液相色谱检测采用C₁₈反相键合硅胶色谱柱，流动相1和流动相2进行梯度洗脱，并以电喷雾检测器检测，所述流动相1为0.1%（体积比）的甲酸水溶液，流动相2为0.1%（体积比）的甲酸乙腈溶液，按体积百分比计，所述洗脱梯度如下：

0-0.5分钟，流动相1为95%，流动相2为5%；

0.5-3分钟，流动相1由95%匀速变为80%，流动相2由5%匀速变为20%；

3-13分钟，流动相1由80%匀速变为60%，流动相2由20%匀速变为40%；

13-18分钟，流动相1由60%匀速变为0，流动相2由40%匀速变为100%；

18-20分钟，流动相1为0，流动相2为100%。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述供试品溶液的总离子流图谱包括具有如下保留时间及离子质量数的特征峰：4.4min（525.1614）、4.8min（491.1195）、5.2min（193.0506）、6.4min（977.5327）、6.9min（845.4904）、8.9min（721.2349）、10.9min（599.2997）、12.1min（829.4591）、12.8min（945.5428）、14.0min（283.0248）、16.2min（269.0455）。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中，所述供试品溶液的总离子流图谱包括具有如下保留时间及离子质量数的特征峰：4.4min（525.1614）、4.8min（491.1195）、5.2min（193.0506）、6.4min（977.5327）、6.9min（845.4904）、7.8min（507.1508）、8.1min（463.1610）、8.3min（645.2193）、8.5min（867.2939）、8.9min（721.2349）、10.1min（623.1770）、10.9min（599.2997）、12.1min（829.4591）、12.8min（945.5428）、13.7min（871.4697）、14.0min（283.0248）、14.2min（659.2345）、15.0min（513.1766）、15.4min（913.4802）、16.2min（269.0455）、16.9min（535.3640）。

5.根据权利要求3或4所述的方法，其中，所述方法还包括步骤（4）：

以供试品溶液的总离子流图中的保留时间为4.4min的特征峰为S峰，计算各特征峰的相对保留时间；计算供试品溶液的总离子流图和对照品溶液的总离子流图中保留时间相对应的特征峰之间的峰面积比值。