[发明专利]鼠源DCF1特异性多克隆抗体及其制备方法有效
申请号: | 201210162998.6 | 申请日: | 2012-07-18 |
公开(公告)号: | CN102702356A | 公开(公告)日: | 2012-10-03 |
发明(设计)人: | 文铁桥;程华 | 申请(专利权)人: | 上海大学 |
主分类号: | C07K16/24 | 分类号: | C07K16/24 |
代理公司: | 上海上大专利事务所(普通合伙) 31205 | 代理人: | 陆聪明 |
地址: | 200444*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 鼠源 dcf1 特异性 克隆 抗体 及其 制备 方法 | ||
1.一种鼠源DCF1特异性多克隆抗体,其特征在于所述的特异性多克隆抗体是将SEQ ID NO:2的第44位到76位氨基酸残基组成的多肽特异性结合。
2.根据权利要求1所述的鼠源DCF1特异性多克隆抗体,其特征在于所述的特异性多克隆抗体是将SEQ ID NO:2的第44位到76位氨基酸残基对应的cDNA序列构建到原核表达质粒pGEX-4T-1中,得到重组质粒pGEX-4T1-59a,再将该重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,得到可溶表达带有鼠源DCF1第44位到76位氨基酸残基的多肽融和蛋白。
3.根据权利要求2所述的鼠源DCF1特异性多克隆抗体,其特征在于所述的特异性多克隆抗体是将多肽融和蛋白作为抗原免疫动物而获得。
4.一种制备根据权利要求1、2或3所述的鼠源DCF1特异性多克隆抗体的方法,其特征在于该方法的具体步骤为:
a.对DCF1氨基酸序列进行了蛋白跨膜结构预测,其中第1到239位氨基酸为胞外段结构;
b.用PCR处于胞外段第44到76位氨基酸残基对应的cDNA,重组入pGEX-4T-1中,构建成pGEX-4T1-59a载体;
c.将载体转化到BL21(DE3)中,原核可溶表达表达得到包含目的DCF1多肽的可溶性融合蛋白;
d.将融合蛋白为抗原免疫动物燥,得到以上述制备的蛋白,按照多抗免疫方案进行动物免疫,得到特异性多克隆抗体。
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