[发明专利]截短型维甲酸诱导蛋白tRAI16用作肝细胞癌标志物的应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体地说，涉及一种截短型维甲酸诱导蛋白tRAI16作为肝细胞癌标志物，在制备检测肝细胞癌的试剂或试剂盒中的应用。

背景技术

原发性肝癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)是严重威胁人类生命健康的疾病。肝细胞癌恶性程度高，容易复发和转移，预后差，而且早期诊断较困难，往往延误了最佳治疗时期。我国是肝癌高发国家，每年约11万人死于肝癌，占全世界肝癌死亡人数的45％。发病率和死亡率呈现上升趋势，且发病年龄构成年轻化，每年用于肝癌治疗的医疗支出大为增加，肝癌严重危害我国人民生命财产安全，并且是影响社会经济发展的一个重要因素。

肝癌的及早发现和确诊对于提高患者的生存率至关重要，而目前广泛采用检测血清中甲胎蛋白(Alpha fetoprotein，AFP)来确诊HCC，其敏感性、特异性及准确性均不理想，尤其对肿瘤直径小于3cm的小肝癌患者，其敏感性及阳性率更低，仅分别为33％～65％和9.1％～26％(AFP>20ug／L)。近年来已有20余种的基因异常表达被确定与肝癌的发生发展有关，但已确定的肝癌相关基因在肝癌中的异常表达率并不高，肝癌的发病机制至今仍未阐明，肝癌的早期诊断率仍有待提高。此外，传统的肝癌手术加化疗以及近年来配合使用的多种基因治疗方法仍没有明显提高肝癌患者的生存率，因而寻找新的肝癌相关基因、尤其是肝癌高表达基因对于探讨肝癌的发病机制具有重要意义。

因此，研究和开发在肝细胞癌中高表达的基因和／或蛋白质具有重要意义，寻找新的在肝细胞癌中高表达的基因和／或蛋白质也具有迫切需要性。而且，加大力度进行我国肝癌的基础研究具有战略意义，分离和鉴定新的肝癌相关基因是肝癌基础研究中的前沿课题。

截短型维甲酸诱导蛋白tRAI16（truncated retinoic acid induced protein 16）的NCBI登录号为AAQ06676.1，Swissprot登录号为Q86V87，IPI号为IPI00654780.2。截短型维甲酸诱导蛋白tRAI16是维甲酸诱导产生的蛋白分子，其结构与功能目前尚未清楚。截短型维甲酸诱导蛋白tRAI16最初是在维甲酸诱导细胞分化时分离出来的，而维甲酸具有抑制细胞增殖、促进细胞调亡和促进细胞分化的作用，已被应用于急性淋巴细胞白血病、肺癌及肝癌等多种癌症的治疗（Okuno M,Kojima S,Matsushima-Nishiwaki R,Tsurumi H,Muto Y，Friedman SL,Moriwaki H.Retinoids in cancer chemoprevention.Curr Cancer Drug Targets.2004;4:285-98）。

因此，截短型维甲酸诱导蛋白tRAI16很可能也参与一系列生理过程，在细胞增殖、分化、以及细胞凋亡等方面发挥重要作用。

现有研究中，仅由Wang等发现全长型维甲酸诱导蛋白RAI16在肝细胞再生中发挥重要作用（Wang G，Deng J,Yang J,Zheng JJ,Wang HZ,Hu Q,Zhang ZM,Chen C,Wang D,Li ZP.Analysis on the protein structure and function of retinoic acid induced 16.World J Gastroenterol.2007;15:1342-1346）。此外，未发现其他关于截短型维甲酸诱导蛋白tRAI16参与细胞功能，特别是癌症、肝细胞癌的相关报道。

发明内容

本发明的目的在于截短型维甲酸诱导蛋白tRAI16的新用途。

本发明通过免疫印迹实验，发现截短型维甲酸诱导蛋白tRAI16在人类肝细胞癌组织及相应的癌旁组织中存在差异表达的蛋白质(在癌组织中下调表达)。

本发明通过免疫组织化学实验，验证了截短型维甲酸诱导蛋白tRAI16的确在肝细胞癌组织及相应的癌旁组织中存在差异表达(在癌组织中下调表达)。

本发明通过肝细胞癌组织芯片，对62对人肝细胞癌的癌组织与癌旁组织进行的免疫组织化学实验，进一步证实了截短型维甲酸诱导蛋白tRAI16在人类肝细胞癌的癌组织与癌旁组织中存在差异表达(在癌组织中下调表达)。

基于截短型维甲酸诱导蛋白tRAI16与肝细胞癌的这种相关性，本发明人认为tRAI16可以作为一种检测肝细胞癌的蛋白质分子标记物，通过对它的表达量进行定性或定量检测，用于检测肝细胞癌。