[发明专利]一种抑制结核分枝杆菌的化合物、其筛选方法和用途

权利要求书

1.一种抑制结核分枝杆菌化合物的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）建立以酪氨酸磷酸酶为靶点的筛选模型：以结核菌H37Rv株基因组DNA为模板，PCR克隆酪氨酸磷酸酶基因，转化寄主细胞，培养转化体，从培养物中获得重组酪氨酸磷酸酶，进行酶活分析，建立以酪氨酸磷酸酶为靶点的筛选模型；

（2）利用步骤（1）所建立的筛选模型筛选对酪氨酸磷酸酶具有抑制活性的化合物。

2.如权利要求1所述的抑制结核分枝杆菌化合物的筛选方法，其特征在于，所述步骤（1）中采用的宿主细胞为大肠杆菌，用表达载体的目的片段经双酶切，与pET-28a(+)载体连接，转化至大肠杆菌BL21，经IPTG诱导，得到高效可溶性表达，获得重组酪氨酸磷酸酶。

3.如权利要求1所述的抑制结核分枝杆菌化合物的筛选方法，其特征在于，所述步骤（1）中采用酪氨酸磷酸酶试剂盒对重组酪氨酸磷酸酶进行酶活分析。

4.一种抑制结核分枝杆菌的化合物，其特征在于，所述化合物采用权利要求1中的方法筛选得到。

5.如权利要求3所述的抑制结核分枝杆菌的化合物，其特征在于，所述化合物命名为Bostrycin，所述化合物的分子结构式为：

6.如权利要求4或5所述的抑制结核分枝杆菌的化合物，其特征在于，所述化合物是海洋微生物天然代谢活性产物。

7.如权利要求4或5所述的抑制结核分枝杆菌的化合物，其特征在于，所述化合物抑制结核分枝杆菌的最低浓度为7.5μg/mL。

8.一种如权利要求4或5所述的化合物，其特征在于，所述化合物的作用靶点为酪氨酸磷酸酶。

9.一种如权利要求8所述的化合物，其特征在于，所述化合物的作用靶点的验证方法包括以下步骤：

（1）利用权利要求1中步骤（1）所建立的模型验证化合物对酪氨酸磷酸酶的酶活抑制活性；

（2）利用Docking软件进行生物信息学预测，化合物与酪氨酸磷酸酶相互作用；

（3）利用荧光光谱验证，化合物与酪氨酸磷酸酶相互作用；

（4）利用圆二色谱验证，化合物与酪氨酸磷酸酶相互作用。

10.一种如权利要求4或5所述化合物在制备用于治疗诱因或诱因之一是酪氨酸磷酸酶的疾病的药物中的用途。