[发明专利]向萝卜肉质根中引入荧光示踪剂的方法及其应用有效

专利信息
申请号: 201210160733.2 申请日: 2012-05-22
公开(公告)号: CN102680670A 公开(公告)日: 2012-09-19
发明(设计)人: 王绍辉;杨瑞;杨柳;程继鸿;王建立;杜鲜云;房克凤 申请(专利权)人: 北京农学院
主分类号: G01N33/48 分类号: G01N33/48;G01N21/64
代理公司: 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人: 关畅
地址: 102206 北*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 萝卜 肉质 引入 荧光 示踪剂 方法 及其 应用
【权利要求书】:

1.向萝卜肉质根中引入荧光示踪剂的方法,包括如下步骤:在萝卜植株功能叶的叶柄表面制造伤口,然后用2.5mM的EDTA水溶液冲洗所述叶柄,然后采用9-19分钟将50-200微升荧光素CFDA溶液滴加至所述叶柄上;所述荧光素CFDA溶液中,荧光素CFDA的浓度为1mg/mL。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述制造伤口的方法为:用砂布摩擦所述叶柄的表皮。

3.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于:每个萝卜植株对一个所述功能叶的叶柄表面制造伤口。

4.如权利要求1至3中任一所述的方法,其特征在于:所述荧光素CFDA溶液是用稀释液稀释荧光素CFDA母液得到的;所述荧光素CFDA母液的制备方法为:用丙酮溶解荧光素CFDA,使荧光素CFDA的浓度为25mg/mL,得到荧光素CFDA母液;所述稀释液由Mes-Tris和山梨醇和水组成,Mes-Tris的浓度为5mM,山梨醇的浓度为300mM。

5.如权利要求1至4中任一所述的方法,其特征在于:所述萝卜的品种为‘北农1号’;所述萝卜植株为从“拉十字”开始计时第0至35天间的萝卜植株。

6.权利要求1至5中任一所述方法在检测萝卜肉质根的同化物卸载中的应用。

7.如权利要求6所述的应用,其特征在于:从滴加完所述荧光素溶液开始计时,4小时后将所述萝卜植株的肉质根切片,用荧光显微镜进行荧光观察和透射观察。

8.如权利要求7所述的应用,其特征在于:所述荧光观察的参数为:激发光波长480nm,发射光波长515nm。

9.如权利要求6至8中任一所述的应用,其特征在于:分别将不同发育阶段的萝卜植株进行权利要求1至5中任一所述的方法,通过所述荧光观察和所述透射观察判断萝卜肉质根的同化物卸载过程。

10.如权利要求6至9中任一所述的应用,其特征在于:所述萝卜植株为从“拉十字”开始计时第0至35天间的萝卜植株。

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