[发明专利]一种降低血清中胰酶抑制物的方法及其应用

权利要求书

1.一种降低血清中胰酶抑制物的方法，其特征在于：其包括以下步骤：

1）血清解冻：将保存的血清解冻；

2）离心处理：血清解冻后，离心处理，去除血清中的大块沉淀物；

3）一次初步过滤：使用孔径为50-100K横向切流浓缩仪，对上述血清进行一次初步过滤，去处血清中的大分子物质，收集一次滤液；

4）二次初步过滤：使用孔径为20-40K横向切流浓缩仪，对上述滤液进行二次初步过滤，去处滤液中的大分子物质，收集二次滤液；

5）深度过滤：使用孔径为5-10K超滤系统，对上述二次滤液进行超滤，收集血清滤液，得到减少了胰酶抑制物的血清。

2.根据权利要求1所述的降低血清中胰酶抑制物的方法，其特征在于：所述血清解冻步骤是将-20℃保存的血清放在2-8℃冰箱中过夜解冻。

3.根据权利要求1所述的降低血清中胰酶抑制物的方法，其特征在于：所述离心处理步骤中是使用5000-8000转/分的离心机，将解冻后的血清离心20-30分钟。

4.权利要求1中减少胰酶抑制物的血清用于禽流感病毒的接种繁殖。

5.如权利要求4所述的禽流感病毒的接种繁殖方法，其特征在于：其步骤如下：首先用含有胎牛血清的MEM培养基培养细胞，待细胞致密后倒掉培养液；然后使用PBS洗涤细胞，直到把细胞瓶培养瓶中的血清洗净，再加入少量禽流感病毒-胰酶溶液细胞进行接种，接种后倒掉禽流感病毒-胰酶溶液，加入1-2%减少胰酶抑制物的血清和胰酶进行禽流感病毒的繁殖。

6.根据权利要5所述的禽流感病毒的接种繁殖方法，其特征在于：所述禽流感病毒繁殖过程中，MEM培养基中胎牛血清或者减少胰酶抑制物的血清的含量占培养基重量的1-2%。

7.根据权利要6所述的禽流感病毒的接种繁殖方法，其特征在于：所述细胞为MDCK或Vero细胞。