[发明专利]一种具有高稳定性、长半衰期的SOD保健酒的生产工艺

说明书

一、技术领域

本发明涉及一种功能性饮用酒的生产工艺，特别是一种具有高稳定性、长半衰期的SOD保健酒的生产工艺。

二、背景技术

我国是酒的故乡，也是酒文化的发源地，是世界上最早酿酒的国家，早在2000年前就发明了酿酒技术，随着科技的发展和消费者日益丰富的物质生活需求，现在已发展到能生产各种浓度、各种香型、各种功能作用的酒类。

氧对一切需氧生物是必不可少的生存条件，但是高浓度氧对有机体是有害的，会引起氧中毒。实验已证明，氧中毒是由于氧在机体内大量地被转变为活性氧自由基，氧自由基可以进攻和损害细胞膜、蛋白质、酶和DNA，从而引起组织病变、器官功能失常。超氧化物歧化酶（SOD）作为生物体内的一种抗氧化酶，是生物体内清除自由基的首要物质。因此SOD具有保护人体的正常代谢机能的作用，如抗氧化、抗衰老、抗疲劳、消炎、预防慢性病及其并发症。正是由于SOD的功效，使其在化妆品、饮料、食品、药品等行业被广泛使用。SOD保健酒便是其中一种。

天然SOD冻干粉在酒中的稳定性较差，而酒类的待售期往往较长，如此便造成酒未售完，产品已变质的情况，造成巨大的经济损失。同时，天然SOD在人体胃环境中稳定性极差，易被水解，且在体内酶活力半衰期通常只有5~8min，并不能达到应有的功效。

同时，有SOD存在时，超氧阴离子自由基歧化产生单线态氧，且反应速度提高14倍，使过氧化氢（H₂O₂）量增加。H₂O₂能穿透细胞膜，这是超氧阴离子自由基所不及的，进入细胞后，H₂O₂通过Fenton反应生成反应性极强的羟自由基，这是已知的最强氧化剂，几乎能和所有的细胞成分发生反应，速度常数很高。因此单一加入SOD冻干粉的SOD保健酒，既有利又有弊，需探究一种更为全面的工艺。

三、发明内容

针对上述情况，本发明的目的就是提供一种具有高稳定性、长半衰期的SOD保健酒的生产工艺，该工艺既可以克服天然SOD冻干粉在白酒中稳定性差、在人体内半衰期短的问题，又可有效地解决了在白酒中单一应用SOD的隐患，使消费者身体更加健康。

如上构思，本发明的技术方案是：一种具有高稳定性、长半衰期的SOD保健酒的生产工艺，其特征在于：包括如下步骤：

①将活化的聚乙二醇PEG与SOD冻干粉按摩尔比溶于四硼酸缓冲液中反应；

②将步骤①的产物在透析缓冲液中透析1-3h，然后用用聚乙二醇PEG浓缩成浓缩液；

③将浓缩液进行柱层析，收集第一蛋白峰，冷冻干燥后获白色PEG-SOD冻干粉；

④将PEG-SOD冻干粉溶于去离子水中，得到修饰后的SOD溶液；

⑤将修饰后的SOD溶液倒入白酒中，再加入木犀草素，搅拌均匀，即得高稳定性、长半衰期SOD保健酒。

上述活化的聚乙二醇PEG的分子量为6000，其与SOD冻干粉的摩尔比为40:1，四硼酸缓冲液的pH=9.2。

上述透析缓冲液pH=7.3，透析时间为2小时。

上述柱层析采用Sephadex-G75。

本发明的优势在于：本发明生产工艺独特、产品质量好、饮用效果佳，克服了天然SOD保健酒存放期短，SOD在体内半衰期短的问题，同时木犀草素的存在也解决了SOD歧化“过剩超氧阴离子自由基所产生的过氧化氢对人体的危害，对人体更加健康。

本发明是用PEG-6000对SOD进行修饰，PEG-6000与SOD酶活力中心相连，改变了其属性，使其更稳定，功效更好，同时加入木犀草素可与SOD在人体内的反应作用互补，使高稳定性、长半衰期SOD保健酒与其他SOD酒相比有更大的优势，更强的竞争力。

具体实施方式：

一种具有高稳定性、长半衰期的SOD保健酒的生产工艺，包括如下步骤：

（1）将2g 6000U/mg的SOD冻干粉和15ml活化的的PEG-6000溶于185ml四硼酸缓冲液（pH9.2）中反应；活化的聚乙二醇PEG与SOD冻干粉的摩尔比为40:1；

（2）将反应液置于pH7.3的缓冲液中透析2小时（透析袋使用前必须处理，将透析袋剪成一定长度，再将透析袋置于0.5mol/LEDTA溶液中煮0.5h，弃去溶液，用蒸镏水洗净），用PEG浓缩透析液；

（3）将浓缩液过Sephadex-G75柱层析，收集第一蛋白峰，冷冻干燥得修饰后SOD冻干粉，将修饰后SOD冻干粉溶于20ml去离子水得修饰后SOD溶液；