[发明专利]生态环境勘察中的微生物采集方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种微生物采集方法，具体涉及一种生态环境勘察中的微生物采集方法。

背景技术

丛枝菌根真菌(AMF)是一种普遍存在的内共生真菌，它能够与80％以上的陆生植物形成共生体。丛枝菌根真菌在维持植物根际生态系统的稳定、促进植物的生长、提高宿主植物的抗逆性和提高退化土壤质量方面起着至关重要的作用。丛枝菌根真菌由菌根孢子(果)、丛枝体、泡囊、菌丝组成，它们都可以作为繁殖体。目前，菌根的分离纯化主要采用孢子作为供体，土壤中小孢子果、孢子和土生辅助细胞通常利用湿筛法采集。利用单一孢子作为菌源有诸多不利因素，首先，孢子侵染速度中等，菌种繁殖体数量积累较慢；其次，湿筛过程中孢子量少的土壤中由于土粒和有机颗粒的干扰，不容易分离孢子；同时湿筛过程中体积较大或较小的颗粒可能丢失。虽然利用孢子作为繁殖体可得到纯种，但是由单一菌源生产的菌剂在自然界中作用很难实现最大化，野外环境的改变、菌种之间的拮抗性和宿主植物对菌种的选择性等都会对单一菌源造成影响，由此生产的菌剂野外难以推广应用。丛枝菌根真菌是专性活体营养寄生菌，只有在活体植物根上形成菌根后才能繁殖成孢子和孢子果，实验室内很难复制菌根和宿主植物之间根际微环境，加之菌根繁殖体在土壤中的数量、存活时间、活性大小、侵染速率等方面差异性大，室内难以筛选出适合野外生长菌根菌群。因此，在随着菌根在矿区生态重建、土壤修复以及农业生物肥力等方面越来越广的应用情况下，野外原位采集丛枝菌根菌群和利用复合菌群生产菌剂就变的至关重要。

发明内容

针对现有技术中丛枝菌根真菌采集方法的不足，本发明提供一种生态环境勘察中的微生物采集方法。

本发明提供一种生态环境勘察中的微生物采集方法，所述微生物为丛枝菌根真菌，所述采集方法包括以下步骤：

(1)制作采集菌袋：选取孔径为30μm的布作为菌袋材料；用该菌袋材料制成菌袋；所述菌袋的一端设有开口；

(2)制备供试基质：供试基质为目标采集区的土壤，将所述土壤过孔径为1mm的筛子，然后将过筛后的土壤灭菌并干燥备用；

(3)将步骤(2)中得到的供试基质装入步骤(1)中制作的菌袋中，填装完毕后，将所述菌袋的开口封闭；

(4)将步骤(3)中得到的装有供试基质的菌袋紧靠宿主植物根部放置，放置完成后，覆盖土壤。

优选地，所述微生物采集方法具体包括以下步骤：

(1)制作采集菌袋：选取孔径为30μm的尼龙布作为菌袋材料；用该菌袋材料制成菌袋；所述菌袋的长度为5～15cm、宽度为4～12cm、厚度为2～5cm；菌袋的一端设有开口；

(2)制备供试基质：供试基质为目标采集区的土壤，将所述土壤过孔径为1mm的筛子，然后将过筛后的土壤灭菌并干燥备用；

(3)将步骤(2)中得到的供试基质装入步骤(1)中制作的菌袋中，每个菌袋的填装量为50～150g，填装完毕后，将所述菌袋的开口封闭；

(4)将步骤(3)中得到的装有供试基质的菌袋紧靠宿主植物根部放置，所述菌袋的放置方式为垂直放置，放置完成后，覆盖土壤。

步骤(4)中，装有供试基质的菌袋紧靠宿主植物根部放置包括：将贴近所述宿主植物根部的土壤挖去，然后将所述装有供试基质的菌袋紧靠宿主植物根部放置。

步骤(1)中，所述菌袋具有防腐功能，即在宿主植物的一个生长季中，该菌袋在土壤中不会腐烂。

优选地，步骤(1)中，所述菌袋的长度为10cm、宽度为8cm、厚度为3cm；且步骤(3)中，每个菌袋的填装量为100g。

优选地，步骤(1)中，所述菌袋的一端具有牵引绳。采集时，所述牵引绳系在宿主植物的茎干部，便于回收所述菌袋。

本领域技术人员可以理解，为了方便，所述牵引绳优选设置在所述菌袋具有开口的一端。

进一步地，为了使得所述菌袋能够垂直放置，所述牵引绳更优选设置在开口的一端的中部。

步骤(2)中，所述灭菌可以采用本领域技术人员已知的任何方式进行；优选地，所述灭菌采用高温高压蒸汽灭菌。

步骤(3)中，所述开口的封闭可以采用本领域技术人员已知的任何方式进行，例如采用缝合的方式将开口封闭。

本发明提供的生态环境勘察中的微生物采集方法，进一步包括以下步骤：