[发明专利]一种高纯度的3,2″,6″-三-N-乙酰基庆大C1a碱（P1）分离纯化方法

说明书

技术领域

本发明属于半合成化学制药领域，涉及高纯度的3，2″，6″-三-N-乙酰基庆大C1a碱分离纯化方法。

背景技术

氨基糖苷类化合物(Aminoglycosides)是由氨基糖与氨基环醇通过氧桥连接而成的苷类。有来自链霉菌的链霉素等、来自小单孢菌的庆大霉素等天然氨基糖苷类，还有依替米星等半合成氨基糖苷类，均属广谱抗生素。

硫酸依替米星(Etimicin sulfate)是我国科研人员自行研制的，拥有自主知识产权的高效、低毒、抗耐药菌的新一代半合成氨基糖苷类抗生素，是唯一获得国家一类新药证书的抗感染药物。

目前，生产硫酸依替米星使用的工艺均为专利报道的工艺(申请号：93112412.3)。其主要步骤为：庆大霉素C1a碱在溶剂中加入醋酸钴、乙酸酐，生成3，2″，6″，-三-N-乙酰基庆大霉素C1a(P1)，经过提取浓缩，浓缩液通入硫化氢气体除去钴离子，经初步分离得到纯度为90％的P1，然后加入乙醛，在0～5℃冰水浴中用还原剂氢化，得到3，2″，6″，-三-N-乙酰基-1-N-乙基庆大霉素C1a(P2)，经吸附型大孔树脂分离后得到纯度较高的P2，纯度较高的P2加入1N的氢氧化钠溶液，水解回流48小时，水解液经吸附型大孔树脂分离得到纯度为90％以上的1-N-乙基庆大霉素C1a(依替米星)溶液，加酸成盐，活性炭脱色，冷冻干燥，即得依替米星盐。

其中3，2″，6″，-三-N-乙酰基庆大霉素C1a碱(P1)是依替米星产品的关键性中间体。因此分离得到较高纯度的3，2″，6″，-三-N-乙酰基庆大霉素C1a碱对整个依替米星产品的质量的提高意义重大。

3，2″，6″，-三-N-乙酰基庆大霉素C1a碱的化学结构式：

以上工艺方法，其中分离P1的步骤中，由于在脱钴液中含有大量的结构特征以及性质都比较相似的杂质(3，2″-N，N-二乙酰基庆大霉素C1a；3，2″，6″，-N，N，N-三乙酰基庆大霉素C2b；″-N-乙酰基庆大霉素C1a；2″，6″-N，N-二乙酰基庆大霉素C1a)，并且在层析解析过程中它们之间的极性差比较小。同时目前提纯主要采用的是固定床树脂分离法。该传统分离方法分离得到的P1存在纯度低、生产收率低、水和洗脱剂消耗大、周期长、环保压力大等诸多缺点。因此需要开发高效的分离提纯工艺，以提高产品质量，提倡绿色化学。

发明内容

本发明的目的在于提供一种得到高纯度的3，2″，6″，-三-N-乙酰基庆大霉素C1a碱(P1)的方法。

本发明采用连续色谱分离系统组合纳滤膜技术，使3，2″，6″，-三-N-乙酰基庆大霉素C1a碱(P1)能够更有效地得到分离纯化。

本发明是将现有技术中如下步骤：：庆大霉素C1a碱在溶剂中加入醋酸钴、乙酸酐，生成3，2″，6″，-三-N-乙酰基庆大霉素C1a(P1)，经过提取浓缩，浓缩液通入硫化氢气体除去钴离子，得到的P1脱钴液进行进一步纯化实现的。

因此，本发明的分离纯化方法，步骤如下：

步骤a.脱钴液稀释后，上连续色谱柱，分离相关杂质(3，2″-N，N-二乙酰基庆大霉素C1a；3，2″，6″-N，N，N-三乙酰基庆大霉素C2b；″-N-乙酰基庆大霉素C1a；2″，6″-N，N-二乙酰基庆大霉素C1a)，得到高纯度的3，2″，6″，-三-N-乙酰基庆大霉素C1a碱(P1)的解析液；

脱钴液稀释是将反应后的脱钴液用氨水稀释，稀释至P1质量浓度控制在1％～9％，稀释液为氨水。

步骤b.解析液使用截留相对分子量为400以下的纳滤膜过滤，操作压力为0.12～0.35Mpa，操作温度为5～40℃，过滤后滤液浓缩至P1质量浓度为5％～15％；

步骤c.浓缩液再用蒸汽加热真空薄膜浓缩，操作条件为真空度0.02～0.15Mpa，操作温度为35～70℃，浓缩至P1质量浓度为15％～35％；

步骤d.浓缩液用喷雾干燥的方法干燥，得固体，ELSD测定3，2″，6″，-三-N-乙酰基庆大霉素C1a碱纯度≥95％，水分≤5％；