[发明专利]一种紫薇属植物茎尖染色体制片方法有效
申请号: | 201210111914.6 | 申请日: | 2012-04-16 |
公开(公告)号: | CN102645360A | 公开(公告)日: | 2012-08-22 |
发明(设计)人: | 潘会堂;杨冰洁;张启翔;程堂仁;王佳;孙明 | 申请(专利权)人: | 北京林业大学 |
主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王朋飞;王加岭 |
地址: | 100083 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 紫薇 植物 染色体 制片 方法 | ||
1.一种紫薇属植物(Lagerstroemia)茎尖生长点染色体制片方法,包括以下步骤:
1)取紫薇属茎尖生长点于固定液中固定;
2)将固定后的茎尖生长点用蒸馏水洗净转移至前低渗溶液处理;
3)蒸馏水洗净吸干水分,于混合酶液中酶解;
4)将酶解后的茎尖生长点用蒸馏水润洗,低渗处理;
5)将低渗处理后的茎尖置于载玻片,滴加步骤1)所述的固定液,压碎茎尖,烤干载玻片;再次滴加固定液,再次烤干;冷却后滴加荧光染液染色;滴加荧光封片液。
2.如权利要求1所述的制片方法,其特征在于,所述步骤1)为选取紫薇属一年生枝条茎尖生长点或初冬修剪经冷藏处理的枝条水培后新发出的茎尖生长点最内侧长度为0.5~1.0cm的茎尖部分。
3.如权利要求2所述的制片方法,其特征在于,所述步骤1)取材时间为上午9:00~11:00。
4.如权利要求1所述的制片方法,其特征在于,所述步骤1)固定液其配方为无水乙醇∶冰醋酸∶三氯甲烷体积比为5∶3∶2。
5.如权利要求1所述的制片方法,其特征在于,所述步骤1)固定时间为18~24h。
6.如权利要求1所述的制片方法,其特征在于,所述步骤2)前低渗溶液处理时间为20~30min。
7.如权利要求1所述的制片方法,其特征在于,所述步骤3)混合酶液为2.5%纤维素酶∶2.5%的果胶酶∶0.01%蛋白酶K按体积比2∶1∶2-3配制得到。
8.如权利要求1所述的制片方法,其特征在于,所述步骤3)酶解条件为37℃水浴酶解4~5h。
9.如权利要求1所述的制片方法,其特征在于,所述步骤4)低渗处理的时间为20~30min。
10.权利要求1-9任一所述的制片方法在紫薇属基因组功能学中的应用。
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