[发明专利]一种治疗冠心病心绞痛药物的检测方法

权利要求书

1.一种治疗冠心病心绞痛药物的检测方法，该药物由以下重量份的药材制成：

人参100-500重量份，麦冬100-500重量份，五味子100-300重量份，黄芪150-450重量份，丹参200-600重量份，川芎100-300重量份，山楂200-400重量份，微晶纤维素300-500重量份，甘露醇50-200重量份；

该检测方法包括采用高效液相色谱法检测所述药物中的人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re和人参皂苷Rb₁，其中，所述高效液相色谱的条件包括：

采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；

采用乙腈溶液为流动相A，水为流动相B，进行梯度洗脱，所述梯度洗脱的过程为：第0-25分钟，流动相A乙腈溶液为15％体积，流动相B水为85％体积；第25-70分钟，流动相A乙腈溶液为15-22％体积，流动相B水为85-78％体积；第70-80分钟，流动相A乙腈溶液为22-30％体积，流动相B水为78-70％体积；第80-105分钟，流动相A乙腈溶液为30-40％体积，流动相B水为70-60％体积；第105-120分钟，流动相A乙腈溶液为40-15％体积，流动相B水为60-85％体积。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱的条件还包括：柱温为25～40℃，优选为30℃。

3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱的条件还包括：检测波长为203nm；流速为1mL·min^-1。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的检测方法，其特征在于，对照品溶液的制备方法如下：

精密称取人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re对照品适量，加甲醇制成每1ml各含0.2mg的混合溶液，作为对照品溶液。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的检测方法，其特征在于，供试品溶液的制备方法如下：

取所述药物适量，研细，取约4g，精密称定，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放至室温，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，滤过，精密量取续滤液25ml，蒸干，残渣用水20ml分次转溶至分液漏斗中，用三氯甲烷萃取3次，每次15ml，弃去三氯甲烷液，水层用水饱和的正丁醇萃取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用0.5％NaOH溶液洗涤4次，每次15ml，合并碱洗液，用水饱和的正丁醇萃取2次，每次10ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗3次，每次15ml，分取正丁醇层，置水浴上蒸干，残渣用20％乙腈溶解，并定容至5ml，作为供试品溶液。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述药物的制备方法如下：

1)将所述的人参粉成细粉，备用；

2)将所述量的五味子、丹参加入6-12倍体积的85％乙醇回流提取，过滤，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.10-1.35的清膏，备用；

3)将所述量的麦冬、黄芪、川芎、山楂加6-12倍体积的水煎煮，煎液滤过，加等体积的85％的乙醇，充分搅拌后，静置过夜，得醇沉液；

4)将步骤3)所得醇沉液，滤去沉淀物，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.20-1.40的清膏，备用；

5)将步骤2)和步骤4)所得的清膏合并，加入步骤1)所得人参细粉及300-500重量份的微晶纤维素和50-200重量份甘露醇混匀，制成微丸。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述药物的制备方法如下：

1)将所述量的人参粉成细粉，备用；

2)将所述量的五味子、丹参加入8倍体积的85％乙醇回流提取，过滤，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.15-1.12的清膏，备用；

3)将所述量的麦冬、黄芪、川芎、山楂加8倍体积的水煎煮，煎液滤过，加等量的85％的乙醇，充分搅拌后，静置过夜，得醇沉液；

4)将步骤3)所得醇沉液，滤去沉淀物，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.30-1.36的清膏，备用；

5)将步骤2)和步骤4)所得的清膏合并，加入步骤1)所得人参细粉及400重量份的微晶纤维素和100重量份的甘露醇混匀，制成微丸。