[发明专利]牡丹胚性愈伤组织的培养方法及其培养基有效

专利信息
申请号: 201210101820.0 申请日: 2012-04-09
公开(公告)号: CN103355165A 公开(公告)日: 2013-10-23
发明(设计)人: 胡永红;殷丽青;周音;刘炤;高清华;张建军;孙翊;王新其 申请(专利权)人: 上海植物园;上海市农业科学院
主分类号: A01H4/00 分类号: A01H4/00
代理公司: 上海开祺知识产权代理有限公司 31114 代理人: 费开逵
地址: 200231 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 牡丹 胚性愈伤 组织 培养 方法 及其 培养基
【权利要求书】:

1.一种用于诱导牡丹胚性愈伤组织的培养基,包含以下物质:

其中,mg/L表示每升培养基中含各成分的毫克数,培养基的pH=5.8-6.0。

2.一种牡丹胚性愈伤组织的培养方法,包括以下步骤:

1)采集授粉后80-115天的半成熟牡丹种子,筛选其中颗粒饱满的种子,用流水冲洗,再用70%(体积比)酒精消毒,然后用10-15%(体积比)的次氯酸钠溶液消毒,最后用无菌水冲洗;

2)在超净台上,用解剖刀切开消毒后的牡丹种子,剥取种胚;

3)将种胚接种到权利要求1所述的培养基中,进行暗培养;

4)暗培养25-35天后,得胚性愈伤组织;

5)将暗培养获得的胚性愈伤组织在新鲜的权利要求1所述的培养基上继代1-2次后,部分胚性愈伤组织逐渐产生胚状体;

6)将胚性愈伤组织和胚状体培养于去除PIC成分的权利要求1所述的培养基上,置于光照条件下培养,20-30天后胚性愈伤组织逐渐分化不定芽,胚状体萌发形成小植株;

7)将不定芽直接切割成单芽,转入生根培养基诱导生根,形成牡丹完整植株。

3.根据权利要求2所述的培养方法,其特征在于,所述的半成熟牡丹种子的形状大小如成熟牡丹种子,颜色为乳白色至淡褐色,种壳不硬。

4.根据权利要求2所述的培养方法,其特征在于,所述的暗培养温度为24-26℃。

5.根据权利要求2所述的培养方法,其特征在于,步骤6)光照条件下培养温度为24-26℃,光照强度为1500-2500勒克斯。

6.根据权利要求2所述的培养方法,其特征在于,步骤7)的生根培养基配方为:1/2MS+IBA 5mg/L+蔗糖15g/L。

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