[发明专利]一种马蹄种苗培植的方法

权利要求书

1.一种马蹄种苗培植的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

A.对优质马蹄种果进行无菌处理得到无菌培养物，并对无菌培养物进行小芽诱导

将优质马蹄种果以水洗净，以0.2％～0.4％的高锰酸钾溶液浸泡15min；放进恒温箱中以20℃～25℃进行培养，直到芽体尖端露白；切取马蹄芽体，剥去芽体外包叶鞘直至芽体中的节清晰可见；用洗衣粉浸泡芽体15min，以清水洗净；超净无菌条件下以75％的酒精浸泡芽体30s，然后以0.1％的氯化汞溶液(内含0.01％Tween80)浸泡10～15min，以无菌水冲洗数次，吸干芽体所含水分；横切芽体节处，取芽体的上部分接种于小芽诱导培养基上，室温无菌条件下避光培养24h，然后以1500～2000lx的光照强度每天光照10～14h，得到小芽；

B.对小芽进行分化与增殖培养，得到丛生芽

将得到的小芽接种于分化与增殖培养基中，室温无菌条件下以1500～2000lx的光照强度，每天光照10～14h培养40～60天，得到丛生芽；

C.对丛生芽进行生根培养，得到无菌种苗

将得到的丛生芽接种到生根培养基中，室温下以1500～2000lx的光照强度条件，每天光照10～14h培养7～21天，得到长出根系的无菌种苗；

D.对无菌种苗进行炼苗培育和驯化栽培，得到用于种植的脱毒种苗

选择根系发达且生长健壮的无菌种苗，保持湿润环境下进行1～3天的炼苗培养，然后转移至试验田进行驯化栽培，避光培养14～40天，得到用于种植的脱毒种苗。

2.根据权利要求1所述的马蹄种苗培植的方法，其特征在于，步骤A中所述的小芽诱导培养基成份是基础培养基中加入糖类24～32g/L，琼脂4～8g/L，并加入1～3.0mg/L的6-BA，所述小芽诱导培养基灭菌前的酸碱值调节为5.8～6.5。

3.根据权利要求1所述的马蹄种苗培植的方法，其特征在于，步骤B中所述的分化与增殖培养基的成份是基础培养基中加入糖类24～32g/L，琼脂4～8g/L，并加入1～3.0mg/L的6-BA及0.1mg/L的NAA或者是加入1.5～2.5mg/L的6-BA、0.1mg/L的NAA及0.05mg/L的ZT，所述分化与增殖培养基灭菌前的酸碱值调节为5.8～6.5。

4.根据权利要求1所述的马蹄种苗培植的方法，其特征在于，步骤C中所述的生根培养基的成份是基础培养基中加入糖类24～32g/L，琼脂4～8g/L，并加入0.1～0.3mg/L的NAA，1～2g/L的活性炭，所述生根培养基灭菌前的酸碱值调节为5.8～6.5。

5.根据权利要求2至4中的任一项所述的马蹄种苗培植的方法，其特征在于，所述糖类包括蔗糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖和白糖中的至少一种。

6.根据权利要求5所述的马蹄种苗培植的方法，其特征在于，所述基础培养基包括MS、B5培养基中的至少一种。

7.根据权利要求1所述的马蹄种苗培植的方法，其特征在于，在步骤A之前还包括步骤：

A0.选取优质的马蹄种果

选取果体丰硕饱满、表面无虫眼、底部圆整、芽体挺拔的马蹄作为种果。

8.根据权利要求1所述的马蹄种苗培植的方法，其特征在于，在步骤D之后还包括步骤：

E.将得到的脱毒种苗移植栽种到大田，进行生长管理，采收马蹄。