[发明专利]与人癌细胞的永生化相关的基因及其应用

说明书

本申请是于2008年12月5日进入中国国家阶段的申请号为200780020862.9的PCT发明申请的分案申请，母案的发明名称为“与人癌细胞的永生化相关的基因及其应用”，其相应的国际申请号为PCT/JP2007/061652，其要求于2006年6月9日提交的申请号为2006-161350的日本专利申请的优先权，上述申请的全部内容完全结合于此作为参考。

技术领域

本发明涉及与癌细胞的永生化相关的基因(永生化规定基因)以及对以具有该基因的永生化癌细胞为靶标的选择性癌治疗有用的方法。更具体而言，本发明涉及以永生化规定基因为指标的永生化癌细胞的判断方法、以及该判断中使用的试剂。本发明还涉及筛选以永生化癌细胞为靶标的选择性抗癌剂(永生化癌细胞增殖抑制剂)的有效成分的方法、以及该抗癌剂(永生化癌细胞增殖抑制剂)。

背景技术

人实体癌除非进行根治手术，否则就会预后不良，其主要原因是因为目前的化学疗法效果并不充分。以往的化学疗法药物以核酸合成过程、DNA、微管为作用点，以抑制从核酸至蛋白质生成过程为基本，因此不仅对癌细胞进行抑制，也无法避免对进行细胞增殖的再生性组织正常细胞的抑制。最近，逐渐鉴定出在癌细胞中特异性表达的分子，以其为靶标的抑制剂能够使对正常细胞的有害反应止于最小限度，其结果是给药量也能够增大。对这样的分子靶标治疗药也进行了开发，但其最大的缺点是，并非对大多病例有效，而是因各个病例的不同而效果不同，给药前所进行的预测是不完全的。作为分子靶标治疗药的效果因各个病例而大不相同的原因，可以举出被作为治疗靶标的分子是与癌症发生过程、转移相关的基因。癌症发生过程不仅因癌类型的不同而不同，即使在同类型癌中也是多种多样的，因此可以认为，作为靶标的分子与癌增殖相关的程度因各个病例而不同。因此，如果能鉴定出无论癌类型而普遍地发挥核心作用的分子，就可以开发出能够期待对多种癌症具有普遍效果的分子靶标治疗药。

包括人在内的所有脊椎动物的染色体的两末端连续有称为“TTAGGG”的简单重复序列(人中约为10kb，小鼠约为数倍)，在每次伴随细胞分裂的DNA复制时不能完全复制末端而每次少量(人中约为200碱基)缩短。该末端结构为“端粒”，当端粒随着细胞分裂而缩短至一定(人非癌细胞中约为5kb)以下时，细胞就已经变得无法分裂。如果癌化则能够继续分裂，但如果端粒缩短到极限(约2kb)，则细胞消亡。通过将该缩短的端粒延长而稳定保持端粒长度能够延长细胞分裂寿命的是逆转录酶“端粒酶”(参照非专利文献1)，该端粒酶不在通常的正常体细胞中表达，因此能够分裂的次数仅限于数十次，而在能够无限增殖的生殖细胞和永生化癌细胞中高度表达。以往普遍认为癌细胞均永生化，但由如下的情况，即，存在即使是临床上明显的癌也未必检测出端粒酶活性的例子(参照非专利文献2和3等)；即便使端粒酶成分TERT在非癌细胞中强制表达，也不显现癌细胞的性状(参照非专利文献4)等情况，目前认为癌化与永生化是不同的现象。

非专利文献1：Harley CB，Mutation Res，256：271-82，1991

非专利文献2：Kim NW等，Science 266：2011-5，1994

非专利文献3：Hiyama K等，J Natl Cancer Inst 87：895-902，1995

非专利文献4：Morales CP等，Nat Genet 21：115-8，1999

非专利文献5：Shay JW，Bacchetti S，Eur J Cancer 33：787-91，1997

非专利文献6：Hiyama K等，J Immunol 155：3711-5，1995

非专利文献7：Hiyama E等，Int J Oncol 9：453-8，1996

非专利文献8：Forsyth NR等，Aging Cell 2：235-43，2003

非专利文献9：Bodnar AG等，Exp Cell Res 228：58-64，1996

非专利文献10：Hiyama K等，Int J Oncol 27：87-95，2005

发明内容

本发明涉及永生化癌细胞的判断方法、以及该判断中使用的试剂。本发明还涉及筛选具有特异性抑制永生化癌细胞的增殖的作用、且作为选择性抗癌剂而有用的永生化癌细胞增殖抑制剂的有效成分的方法以及该永生化癌细胞增殖抑制剂。