[发明专利]一种治疗猪圆环病的卵黄抗体及其复合物的生产方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种治疗猪圆环病的卵黄抗体及其复合物的生产方法属于动保行业兽医兽药领域，所提供卵黄抗体及其复合物可用于猪圆环病的临时预防和免疫失败后的紧急治疗。

背景技术

圆环病毒最早发现于1974年德国学者Tischer等的科研工作；后来的试验证实，来源于猪肾组织的该种病毒基因组由单股环状的DNA组成，由此得名为猪圆环病毒(porcine circovirus，PCV)。按照国际病毒分类委员会第六次学术报告新增病毒科的结论，PCV在分类上属于圆环病毒科、圆环病毒属，是已知的最小的动物病毒之一。该科病毒科内尚无具体的分属标准，共同特征为病毒粒子无囊膜，基因组由一条单股、环状的DNA链组成。被列入该科的动物病毒有猪圆环病毒、鸡传染性贫血病病毒，鹦鹉喙羽病病毒、鸽圆环病毒、金丝雀圆环病毒和人的TT病毒（一种肝炎病毒）等。 

目前的研究认为猪圆环病毒粒子直径14～17nm，呈20面体对称结构，无囊膜，含有共价闭合的单股环状负链DNA，基因组大小约为1.76kb。PCV对外界理化因子的抵抗力相当强，即便在PH3的酸性环境及72℃的高温环境中也能存活一段时间，氯仿作用不失活，无血凝活性。

现已知PCV有两个血清型，即PCV1和PCV2。PCV1基本上无致病性；PCV2被认为是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）的主要病原，此外还有皮炎/肾病综合征、繁殖障碍、呼吸道病复合症、先天性震颤及中枢神经系统疾病等多种临床疾病类型。不同年龄的猪对PCV2均具有较强的易感性，感染猪可自鼻液、粪便等废物中排出病毒，传染途径为口腔和呼吸道。

目前的研究表明，PCV2主要在机体的单核/巨噬细胞中复制，少数可在肾小球、支气管上皮细胞、内皮细胞、肝细胞和淋巴细胞中增殖。一方面，PCV2与其它病毒，如猪繁殖与呼吸道综合征病毒和PPV同时接种试验猪时，这些病毒可以刺激和活化免疫系统，从而促进感染猪体内PCV2的增殖。因此，免疫系统的激活可能是PMWS的触发因素。另一方面，PCV2感染也使机体产生严重的淋巴组织病变，包括淋巴细胞的缺失及淋巴组织免疫细胞亚群的变化，这就使机体的免疫力下降，从而对其它病原不能产生有效的免疫应答，也是该病发生的重要机理。因此，猪感染PCV后免疫刺激与免疫抑制同时存在，这给疾病防御带来很大困难。

在兽医临床上，具有抗病毒作用的化学药物已被禁用；传统中药制剂主要通过提高机体自身免疫水平来实现降低发病率，虽有一定作用但存在效果不稳定的问题；而疫苗免疫甚至不足10％，形成PCV感染普遍存在的局面，造成的经济损失几乎是毁灭性的。因此，急需一种可用于猪圆环病的临时预防和免疫失败后紧急治疗的药物。

发明内容

本发明提供了一种用于猪圆环病的临时预防和免疫失败后紧急治疗的药物___抗猪圆环病卵黄抗体及其复合物，能与圆环病毒发生免疫学反应，同时提高机体自身免疫水平，用于猪圆环病的临时预防和紧急治疗。

一种治疗猪圆环病的卵黄抗体及其复合物的生产方法，其生产过程如下：

（1）、购买猪圆环病毒2型灭活疫苗（LG株）、猪圆环病毒2型（SH株）存储于4～8℃备用；

（2）、购买道地药材板蓝根、黄芪、白术、甘草，按一定比例配伍后加水煎煮，取其浓缩液干燥粉碎后作为中药提取物密封备用；

（3）、购买经检疫合格的SPF蛋鸡雏作隔离饲养；

（4）、于70日龄给全鸡群做猪圆环病毒2型灭活疫苗（LG株）、猪圆环病毒2型（SH株）胸部双侧皮下注射各2头份；

（5）、于77日龄给全鸡群做猪圆环病毒2型灭活疫苗（LG株）、猪圆环病毒2型（SH株）胸部双侧皮下注射各5头份；

（6）、于90日龄给全鸡群做猪圆环病毒2型灭活疫苗（LG株）、猪圆环病毒2型（SH株）胸部双侧皮下注射各10头份；

（7）、于210日龄给全鸡群做猪圆环病毒2型灭活疫苗（LG株）、猪圆环病毒2型（SH株）胸部双侧皮下注射各15头份；

（8）、收集150～360日龄的鸡蛋保存在4℃环境备用；

（9）、在超净台上收集蛋黄，按3倍比例加入灭菌蒸馏水搅拌30分钟以上，配成均一的蛋黄液，转移至4℃环境冷藏、静置12小时，用过滤气泵回收上清液；

（10）、将含卵黄抗体的蛋黄上清液依次通过0.45微米和0.22微米的滤膜进行超滤浓缩，收集介于两种滤膜之间的物质即为卵黄抗体的浓缩液；

（11）、将卵黄抗体浓缩液做50～56℃减压干燥，制成卵黄抗体干粉；