[发明专利]APOB的RNAi调节及其用途

权利要求书

1.一种由有义链和反义链组成的iRNA试剂，其中所述的有义链的序列选自SEQ ID No：1、3、5、21、23、25、27、29、33、35、39、41、43、45、49、51、55、57、59、61、63、65、69、71、73、77、79、83、93、95、97、99、105、107、109、117、121、123、125、127、129、131、133、135、137、143、145、147、153、155、157、159和161，与所述有义链对应的的反义链的序列选自SEQ ID No：2、4、6、22、24、26、28、30、34、36、40、42、44、46、50、52、56、58、60、62、64、66、70、72、74、78、80、84、94、96、98、100、106、108、110、118、122、124、126、128、130、132、134、136、138、144、146、148、154、156、158、160和162，其中每条链中不超过3个核苷酸分别被其它核苷酸所替代，同时基本保持了抑制培养的人HepG2细胞中ApoB表达的能力。

2.根据权利要求1所述的iRNA试剂，其中每条链中不超过2个核苷酸分别被其它核苷酸所替代。

3.根据权利要求1所述的iRNA试剂，其中每条链中不超过1个核苷酸分别被其它核苷酸所替代。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的iRNA试剂，其中所述替代是腺苷被尿嘧啶所替代。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的iRNA试剂，其中，所述iRNA试剂使与这些试剂孵育后培养的人HepG2细胞中存在的ApoB mRNA的量与没有与该试剂孵育的细胞相比降低了50％以上，和/或使分泌到人HepG2细胞培养上清中的Apo蛋白的量降低了50％以上，和/或使该iRNA试剂以50mg/kg体重或者100mg/kg体重给药后，将C57B1/6小鼠的鼠肝脏细胞中所存在的apo-B mRNA的量在体内降低至少20％。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的iRNA试剂，其包括硫代磷酸酯或者2’-修饰的核苷酸。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的iRNA试剂，其包括：

5’-尿苷-腺嘌呤-3’(5’-UA-3’)二核苷酸，其中所述的尿苷是2’-修饰的核苷酸；

5’-尿苷-鸟嘌呤-3’(5’-UG-3’)二核苷酸，其中所述的5’-尿苷是2’-修饰的核苷酸；

5’-胞苷-腺嘌呤-3’(5’-CA-3’)二核苷酸，其中所述的5’-胞苷是2’-修饰的核苷酸；

或者5’-尿苷-尿苷-3’(5’-UU-3’)二核苷酸，其中所述的5’-尿苷是2’-修饰的核苷酸。

8.根据权利要求7所述的iRNA试剂，其中在所有出现的序列基序5’-UA-3’、5’-CA-3’、5’-UU-3’和5’-UG-3’二核苷酸中的最5’端嘧啶都是2’-修饰的核苷酸，

或者在有义链中的所有嘧啶以及在所有出现的5’-UA-3’和5’-CA-3’的最5’端嘧啶都是2’-修饰的核苷酸，

或者其中在有义链中的所有嘧啶都是2’-修饰的核苷酸，以及在反义链中所有出现的序列基序5’-UA-3’、5’-CA-3’、5’-UU-3’和5’-UG-3’中的最5’端嘧啶都是2’-修饰的核苷酸。

9.根据权利要求6所述的iRNA试剂，其中所述的2’-修饰选自2’-脱氧、2’-脱氧-2’-氟、2’-O-甲基、2’-O-甲氧乙基(2’-O-MOE)、2’-O-氨基丙基(2’-O-AP)、2’-O-二甲基氨基乙基(2’-O-DMAOE)、2’-O-二甲基氨基丙基(2’-O-DMAP)、2’-O-二甲基氨基乙氧基乙基(2’-O-DMAEOE)和2’-O-N-甲基乙酰氨基(2’-O-NMA)的组。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的iRNA试剂，其进一步含有胆固醇部分，其中所述的胆固醇部分连接到所述iRNA试剂有义链的3’-末端。

11.根据权利要求1-5中任一项所述的iRNA试剂，其为由序列如SEQ ID No：153所示的有义链和序列如SEQ ID No：154所示的反义链组成的试剂1。