[发明专利]一种宽温淀粉酶的生产方法无效
申请号: | 201210077325.0 | 申请日: | 2012-03-22 |
公开(公告)号: | CN102618518A | 公开(公告)日: | 2012-08-01 |
发明(设计)人: | 郁磊;陶丁伟;邹联 | 申请(专利权)人: | 无锡德冠生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N9/28 | 分类号: | C12N9/28;C12R1/10 |
代理公司: | 无锡市大为专利商标事务所 32104 | 代理人: | 时旭丹;刘品超 |
地址: | 214192 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 淀粉酶 生产 方法 | ||
1.一种宽温淀粉酶的生产方法,其特征在于,采用地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)BL-mut08为出发菌株,地衣芽孢杆菌BL-mut08即CCTCC NO.M207193,经过种子培养和二级液体发酵培养,后处理以后得到宽温淀粉酶,后处理过程为:板框过滤,滤液用截留分子量为10000的中空纤维管式超滤膜浓缩至产品要求活力单位;
(1)斜面培养
斜面培养基,以g/L计:牛肉汁3-6,蛋白胨 5-15,酵母粉或酵母膏1-5,NaCl 1-5,淀粉 5-15,葡萄糖20-80,琼脂 15-25,以去离子水配制;
培养温度 30-40℃,培养时间20-40h;
(2)摇瓶培养
摇瓶培养基,以g/L计:豆饼粉 20-50,棉籽饼粉20-50,(NH4)2SO4 1-10,CaCl2 0.2-1.0,玉米浆 15-40,乳糖100-200,柠檬酸钠 1-10,磷酸氢二钾10-20,磷酸二氢钾5-10,以去离子水配制;
培养温度30-42℃,培养时间 20-40h;
(3)种子罐培养
种子罐培养基,以g/L计:葡萄糖50-100,酵母粉10-50,棉籽饼粉5-20,硫酸铵2-6,柠檬酸钠 2-10,CaCl2 0.2-0.9,聚醚消泡剂P.P.E. 0.2-0.8,磷酸氢二钾4-10,磷酸二氢钾1-10,以去离子水配制;
发酵温度30-40℃,通风量0.2-1.0 V.V.M,罐压0.2~1.0 kg/cm2,培养时间:20-40小时;
(4)生产罐发酵
发酵培养基,以g/L计:葡萄糖50-100,酵母粉10-50,棉籽饼粉5-20,硫酸铵2-6,柠檬酸钠2-10,CaCl2 0.2-0.9,玉米浆 15-50,聚醚消泡剂P.P.E. 0.2-0.8,磷酸氢二钾4-10,磷酸二氢钾1-10,以去离子水配制;
发酵温度30℃-40℃,通风量0.2-1.0 V.V.M,罐压0.2~1.0 kg/cm2,发酵时间40-80小时;
(5)后处理:液态发酵后经过絮凝,加入防腐剂,压滤,滤液用截留分子量为10000的中空纤维管式超滤膜浓缩,收集浓缩液,即得宽温淀粉酶溶液。
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