[发明专利]angiogenin基因作为猪免疫性状的分子标记

说明书

技术领域

本发明属于猪的分子标记辅助选择技术领域，具体涉及一种作为猪标记辅助选择的与免疫性状相关的分子标记的克隆及应用。本发明的分子标记与angiogenin基因有关。 

背景技术

作为主要的动物性蛋白来源，猪的养殖在我国畜牧业中占有举足轻重的地位。数十年来，对猪的遗传改良主要集中于生产性状，其中重点是对胴体性状、生长性状与繁殖性状的选择。由于以往单纯的追求生产性状的改良，导致了猪的抵抗力逐步的降低，以及目前集约化的生产模式使疾病成为了现代猪生产的重要限制因素。疾病尤其是病毒性传染病严重的影响着猪的健康，导致猪的死亡、生产效率降低、医药费用增加等一系列问题，最终造成养猪业的巨大经济损失；它甚至会严重影响和降低猪的遗传育种进程。 

随着遗传学的不断发展，人们已将分子标记技术应用于畜禽抗病育种方面，并且确定了一些与猪疾病抗性有关的候选基因及主效基因。跨越7号染色体着丝粒的猪淋巴细胞抗原(SLA)复合体(Smith TP，Rohrer GA，Alexander LJ，Troyer DL，Kirby-Dobbels KR，Janzen MA，Cornwell DL，Louis CF，Schook LB，Beattie CW.Directed integration of the physical and genetic linkage maps of the swine chromosome 7 reveals that SLA spans the centromere.Genome Research，1995，5：259-271)，即猪主要组织相容性复合体(Major Histocompatibility Complex，MHC)是一组与免疫应答和抗性密切相关的基因家族。在宿主的免疫反应中，对细菌、病毒、寄生虫的遗传控制有重要作用。一些学者对SLA单倍型或等位基因与免疫应答、抗性的关系进行了研究：Rothschild M F等(Rothschild M，Jacobson C，Vaske D，Tuggle C，Wang L，Short T，Eckardt G，Sasaki S，Vincent A，McLaren D，Southwood O，van der Steen H，Mileham A，Plastow G.The setrogen receptor locus is associated with a major gene influencing litter size in pigs[J].Proc Natl Acad Sci，1996，93：201-205)发现微型猪单倍型SLAa/a对感染支气管败血性波氏杆菌高反应存在关联；Hruban V等(Hruban V，Horak V，Fortyn K..Presence of specific MHC haplotype in melano-blstomabearing minipigs.Animal Genetics，1994，25(supp1.2，C1))则观察到SLA I等位基因与恶性黑色素瘤的出现存在关联。位于猪15号染色体q2.3-2.6的NRAMP1基因(Sun HS，Wang L，Rothschild MF，Tuggle CK.Mapping of the natural resistance-associated macrophage protein1(NRAMP1)gene to pig chromosome 15.Animal Genetics.1998，29：138-140)，属于天然抗性相关的巨噬蛋白基因家族，Guolong Zhang等(Guolong Zhang，Hua Wu，Christopher R.Ross，J.Ernest Minton，and Frank Blecha.Cloning of Porcine NRAMP1 and Its Induction by Lipopolysaccharide， Tumor Necrosis Factor Alpha，and Interleukin-1β：Role of CD14 and Mitogen-Activated Protein Kinases[J].Infection And Immunity，2003，3：1086-1093)通过对猪NRAMP1基因的mRNA表达研究发现其在细胞核特异性组织中都可表达，但在巨噬细胞中表达量最高，推测其可能通过消耗含有胞内病原生物的吞噬体中二价金属离子如镁、亚铁、锌等离子使病原微生物缺乏增殖必需的离子而达到抵抗胞内微生物的作用。Kramer J等(Kramer J，Malek M，Lamont SJ.Association of twelve candidate gene polymorphisms and response to challenge with Salmonella enteritidis in poultry.Anim Genet，2003，34：339-348)发现NRAMP1等位基因与鸡沙门氏菌感染反应存在关联。干扰素(interferon，IFN)作为机体最重要的细胞因子之一，因其具有广谱抗病毒、免疫调节、增强功能及其它生物活性而被人们广泛研究。体外重组β-干扰素可显著抑制猪流行性腹泻病毒的感染(曹瑞兵等.猪β-干扰素的原核表达及其对猪流行性腹泻病毒的抑制作用研究[J].中国病毒学，2004，19(4)：364-368)；体内注射猪瘟疫苗和干扰素可增强对猪瘟病毒的防御能力(Suradhat S，Intrakamhaeng M，Damrongwatanapokin S.The correlation of virus-specific interferon-gamma production and protection against classieal swine fever virus infection.Vet Immunol Immunopathol.2001，83(3-4)：177-189)。