[发明专利]一种人工合成的肉桂醛完全抗原及其应用无效
申请号: | 201210067930.X | 申请日: | 2012-03-15 |
公开(公告)号: | CN102584984A | 公开(公告)日: | 2012-07-18 |
发明(设计)人: | 孙秀兰;田秀梅;余雯静;郑利;钱和;张银志 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C07K14/765 | 分类号: | C07K14/765;C07K16/06 |
代理公司: | 北京汇信合知识产权代理有限公司 11335 | 代理人: | 王秀丽 |
地址: | 214122 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 人工合成 肉桂 完全 抗原 及其 应用 | ||
1.一种人工合成的肉桂醛完全抗原,其特征在于以肉桂酸为半抗原,通过活泼酯法与牛血清白蛋白合成免疫原。
2.如权利要求1所述的肉桂醛完全抗原,其特征在于其制备方法如下:
1)合成活泼酯:称取5mg肉桂酸CA、7mg N-羟基琥珀酰亚胺NHS,5.8mg碳二亚胺盐酸盐EDC.HCL,将其溶于1ml的N,N-二甲基甲酰胺DMF中,40℃下磁力搅拌过夜;
2)合成偶联物:将21mgBSA溶于2ml磷酸盐缓冲液PBS中,在磁力搅拌的情况下缓慢添加步骤1制备的混合液,4℃搅拌过夜;反应完成后将反应液在4℃PBS透析72h,每隔6h换一次透析液,之后分装冷冻干燥后-21℃保存。
3.如权利要求1所述的肉桂醛完全抗原,其特征在所述免疫原的表征方法如下:
1)紫外光谱鉴定:将CA-BSA、BSA、CA配制成浓度为0.5mg/ml,在200-500nm下检测;
2)红外光谱鉴定:称取、CA-BSA、BSA、CA各1mg分别与50mg的溴化钾研磨混合,采用溴化钾压片法进行测定;
3)荧光光谱鉴定;将CA-BSA,BSA的浓度配成0.5mg/ml,激发波长285nm,扫描范围为300nm-500nm,狭缝宽度为EX=5.0nm,EM=2.5nm,扫描速度3000nm/min条件下扫描;
4)圆二色谱鉴定:将CA-BSA,BSA浓度均配成0.2mg/ml,在波长为190nm到250nm,光程为0.1cm,扫描速度5s/nm条件下进行测定。
4.权利要求1所述的肉桂醛完全抗原应用于人工抗体的制备。
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