[发明专利]一种人工合成的肉桂醛完全抗原及其应用无效

专利信息
申请号: 201210067930.X 申请日: 2012-03-15
公开(公告)号: CN102584984A 公开(公告)日: 2012-07-18
发明(设计)人: 孙秀兰;田秀梅;余雯静;郑利;钱和;张银志 申请(专利权)人: 江南大学
主分类号: C07K14/765 分类号: C07K14/765;C07K16/06
代理公司: 北京汇信合知识产权代理有限公司 11335 代理人: 王秀丽
地址: 214122 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 人工合成 肉桂 完全 抗原 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种人工合成的肉桂醛完全抗原,其特征在于以肉桂酸为半抗原,通过活泼酯法与牛血清白蛋白合成免疫原。

2.如权利要求1所述的肉桂醛完全抗原,其特征在于其制备方法如下:

1)合成活泼酯:称取5mg肉桂酸CA、7mg N-羟基琥珀酰亚胺NHS,5.8mg碳二亚胺盐酸盐EDC.HCL,将其溶于1ml的N,N-二甲基甲酰胺DMF中,40℃下磁力搅拌过夜;

2)合成偶联物:将21mgBSA溶于2ml磷酸盐缓冲液PBS中,在磁力搅拌的情况下缓慢添加步骤1制备的混合液,4℃搅拌过夜;反应完成后将反应液在4℃PBS透析72h,每隔6h换一次透析液,之后分装冷冻干燥后-21℃保存。

3.如权利要求1所述的肉桂醛完全抗原,其特征在所述免疫原的表征方法如下:

1)紫外光谱鉴定:将CA-BSA、BSA、CA配制成浓度为0.5mg/ml,在200-500nm下检测;

2)红外光谱鉴定:称取、CA-BSA、BSA、CA各1mg分别与50mg的溴化钾研磨混合,采用溴化钾压片法进行测定;

3)荧光光谱鉴定;将CA-BSA,BSA的浓度配成0.5mg/ml,激发波长285nm,扫描范围为300nm-500nm,狭缝宽度为EX=5.0nm,EM=2.5nm,扫描速度3000nm/min条件下扫描;

4)圆二色谱鉴定:将CA-BSA,BSA浓度均配成0.2mg/ml,在波长为190nm到250nm,光程为0.1cm,扫描速度5s/nm条件下进行测定。

4.权利要求1所述的肉桂醛完全抗原应用于人工抗体的制备。

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