[发明专利]猪去氧胆酸的提纯方法

说明书

技术领域

本发明涉及生化制药领域的提纯方法，具体涉及一种猪去氧胆酸的提纯方法。

技术背景

猪去氧胆酸在猪胆汁中含量为8.5~12%。猪去氧胆酸为降血脂药，能抑制胆酸的形成及溶解脂肪，降低血中胆固醇和甘油三酯，适用于Ⅰa或Ⅰb型高血脂症、动脉粥样硬化症。对百日咳杆菌、白喉杆菌、金黄色葡萄球菌等有一定的抑菌作用，可用作消炎药，治疗慢性支气管炎、小儿病毒性上呼吸道炎症等。本品能刺激胆汁分泌，使胆汁变稀而不增加固体量，适用于胆道炎、胆囊炎、胆石症和其它非阻塞性胆汁郁积；亦可加速胆囊造影剂排出肝脏以及有助于显影。尚能促进肠道脂肪分解和脂溶性维生素吸收，可用于肝胆疾患引起的消化不良。

猪去氧胆酸还是人工牛黄配方的重要原料。在药物清开灵中猪去氧胆酸是主要成分之一，但实际工作生产中需要纯度≥99.0%的猪去氧胆酸。

目前公布的关于猪去氧胆酸的提纯方法主要有：

方法1：将粗品加6倍量丙酮和0.04倍量活性炭，加热回流1h，放冷，过滤，合并滤液，析晶，抽滤，真空干燥，即得猪去氧胆酸，熔点168~179℃。

方法2：粗品加4倍量乙酸乙酯回流溶解后，加活性炭脱色（为粗品的5%）继续回流10min，冷却至30~40℃抽滤；滤渣再加3倍量乙酸乙酯回流，过滤，合并滤液，加20%的无水碳酸钠脱水，过滤后浓缩至原体积1/2~1/3，冷却，析出结晶，收率按晾干的粗猪胆汁酸计算约为30%，熔点160~170℃。

方法3：将粗品进行酯化，然后与苯进行加成反应，利用不同胆汁甲酯与苯中的不同溶解度，分离猪去氧胆酸甲酯-苯加成物，分解加成物，调节pH，获得猪去氧胆酸成品。

方法2中，猪去氧胆酸在乙酸乙酯中极微溶，这种方法需要消耗大量乙酸乙酯；方法1和方法2中，试剂使用量大，产品纯度低；方法3所得的猪去氧胆酸含量仍然只能达到＞98.5%，且在工艺中用到致癌物苯。

发明内容

本发明的目的在于：提供一种猪去氧胆酸的提纯方法，利用猪去氧胆酸粗品为原料生产高纯度猪去氧胆酸，精制后产品纯度高，不使用有毒致癌物苯，操作简单，绿色环保。

本发明的技术解决方案是：猪去氧胆酸粗品用氨水溶解过滤去除不溶性杂质，收集滤液；在收集的滤液中，加入乙酸乙酯，静置，除去脂溶性物质，通过虹吸去除乙酸乙酯得水相液；水相液中滴加盐酸溶液，调节pH值，析晶，过滤，水洗，干燥，得猪去氧胆酸纯品。

本发明的提纯方法包括以下具体步骤：

（1）原料粗品的溶解：猪去氧胆酸粗品中加入质量浓度1.0%氨水溶解，猪去氧胆酸粗品与1.0%氨水的质量比为1：25~30，保持温度至室温，搅拌5min，抽滤，过滤去除不溶性杂质，收集滤液；

（2）可溶性脂类物质的去除：在收集的滤液中，加入相当于滤液体积1/5~1/6的乙酸乙酯，搅拌5min，静置6h，通过虹吸去除乙酸乙酯，得水相液；

（3）猪去氧胆酸的析出：将水相液放置烧杯中，滴加质量浓度10.0%盐酸溶液，通过pH计测定pH值至7.2~7.0，至白色沉淀析出继续缓慢搅拌1min，冷至0℃，静置6h析晶，过滤，用晶体重量100倍的纯化水冲洗，真空干燥，得到猪去氧胆酸纯品。

本发明操作方法简单，绿色环保，所得产品纯度HPLC≥99.8%，克服了现有方法所得产品纯度不高、需要使用有毒致癌物苯的缺陷。

附图说明

图1为本发明的猪去氧胆酸提纯流程框图。

图2为猪去氧胆酸原料粗品色谱图。

图3为猪去氧胆酸最终纯品色谱图。

具体实施方式

下面结合实施例进一步对本说明的技术方案进行阐述，这些实施例不能理解为是对技术方案的限制。

实施例1：

取10g猪去氧胆酸粗品加入至烧杯中，再加入质量浓度1.0%氨水3000ml，溶液中猪去氧胆酸含量为3.3%，保持温度至室温，搅拌5min，过滤去除不溶性杂质，收集滤液，收率99%以上；在收集的滤液中加入500ml乙酸乙酯，充分搅拌5min，静置6h，通过虹吸去除乙酸乙酯，得水相液，收率97%；将水相液放置烧杯中，缓慢滴加质量浓度10.0%盐酸溶液，通过pH计调节pH值至7.2，至白色沉淀析出，继续缓慢搅拌1min，冷至0℃，静置6h结晶，过滤，用纯化水1000ml洗涤滤饼，减压干燥得白色结晶猪去氧胆酸9.1g，收率90%。熔点197.5℃以上，HPLC检测纯度为99.8%。原料粗品色谱图及最终纯品色谱图分别见图1、图2、表1、表2。

实施例2：