[发明专利]一种简易、快速分离好氧反硝化芽孢杆菌的方法无效
申请号: | 201210061407.6 | 申请日: | 2012-03-10 |
公开(公告)号: | CN102586156A | 公开(公告)日: | 2012-07-18 |
发明(设计)人: | 朱杰;吴文坤;周呈祥 | 申请(专利权)人: | 安徽联大生物环保科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/02;C12Q1/04;C12R1/07 |
代理公司: | 安徽合肥华信知识产权代理有限公司 34112 | 代理人: | 余成俊 |
地址: | 239000 安徽省*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 简易 快速 分离 好氧反 硝化 芽孢 杆菌 方法 | ||
1.一种简易、快速分离筛选好氧反硝化芽孢杆菌的方法,其特征在于:选择如土壤、池塘水样、 泥样或活性污泥等目标物接种于含有NO2--N/NO3—N的富集培养基中,进行间歇增氧富集培养;然后移取适量富集培养物在75-80℃水浴杀除杂菌后,稀释涂布于含NO2--N/NO3—N梯度平板培养;然后对培养后的平板进行喷涂NO2--N/NO3—N显色液,在平板高浓度NO2--N/NO3—N区域挑挑取菌落周边无显色或显色浅淡菌落,继续用划线法获得纯培养物,对纯培养物革兰氏染色镜检,以内生芽孢杆菌的作为初筛菌株;接着利用纯培养物菌体在不同NO2--N/NO3—N浓度的培养基中,恒温间歇增氧培养,测定其OD600nm吸光度值,以定量的确定芽孢杆菌所适应的NO2--N/NO3—N浓度范围;在确定的适中的NO2--N/NO3—N浓度下,用含有NO2--N/NO3—N的液体富集培养基,分别培养不同好氧反硝化芽孢杆菌,通过测定液体富集培养基中NO2--N/NO3—N含量,以求解其去除率,复筛出好氧反硝氧能力强劲的芽孢杆菌。
2.根据权利要求1所述的简易、快速分离好氧反硝化芽孢杆菌的方法,其特征在于:所述的富集培养基:用的是LB培养基2.0-200.0 mg/l NO2--N/NO3—N;所述的LB培养基(g/l):胰蛋白胨10.0,氯化钠5.0,酵母膏10,水1000ml,PH 7.2,121℃,灭菌25-30min。
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