[发明专利]20(S) 和20(R)-达玛烷-3β,12β,20,25-四醇衍生物及其制备方法和应用

说明书

技术领域：

本发明属于医药技术领域，提供具有抗肿瘤活性的20(S)和20(R)-达玛烷-3β,12β,20,25-四醇衍生物及其制备方法和应用，还涉及该化合物及以该化合物作为活性成分的组合物在抗肿瘤方面的用途。

背景技术：

20(R)-达玛烷-3?,12?,20,25-四醇[20(R)- 25-OH-PPD]具有较强的抗癌活性，能抑制人肿瘤细胞（人乳腺癌、人小细胞肺癌、人胃癌、人结肠癌、人神经胶质癌、人黑色素瘤、人宫颈癌、人肝癌、早幼粒白血病、肉瘤S-180、肝癌腹水型、小鼠宫颈癌-14及艾氏腹水癌等）生长与增殖，诱导肿瘤细胞分化、凋亡，抑制肿瘤新生血管生成、抑制肿瘤的浸润和转移、增强机体免疫力和降低化疗药物毒副作用等抗肿瘤活性。比目前在国内广泛用于抗癌药物的人参皂苷衍生物Rg₃对肿瘤的生长抑制活性高5-15倍。25-OH-PPD还能以剂量依存的方式诱导肺癌细胞系H838（p53野生型）和H358（p53缺失型）的凋亡和抑制细胞增殖，并能使细胞周期阻滞在G1期，不同浓度的该化合物均显示出比其他人参皂苷更强的活性。此外，25-OH-PPD（在50μM和100μM时）有效降低前列腺癌细胞系LNCaP（p53野生型）和PC3（p53缺失型）的存活率，但不影响成纤维细胞；该化合物还能诱导这两种细胞的凋亡，抑制细胞的增殖，并使细胞周期阻滞在G1期。在25-OH-PPD处理过的LNCaP和PC3细胞中，抑癌基因p21、p27和Bax的表达提高，而原癌基因MDM2、Bcl2、E2F1、cdk2、CDK4和Cyclin D1的表达均降低。25-OH-PPD具有较强的抗癌生物活性，但是存在水溶性差、生物利用度低等不足，严重影响了临床上的应用。氨基酸、肽类化合物、基因碱基等对细胞及核酸具有良好的亲和性，将其引入到药物分子中，有利于药物到达细胞组织内而有效地发挥作用。本专利通过对其结构进行修饰，以克服上述缺点，发现高效、低毒的新化合物实体。

发明内容：

本发明提供具有抗肿瘤活性的20(S)和20(R)-达玛烷-3β,12β,20,25-四醇衍生物及其制备方法。

本发明提供的通式（I）的20(S)和20(R)-达玛烷-3β,12β,20,25-四醇衍生物及其盐：

20(S)和20(R)-达玛烷-3β,12β,20,25-四醇衍生物及其盐的通式（I）

其中，R1、R2可为单取代、双取代，或同时取代；R1、R2可为酰化取代的氨基酸、氨基保护的氨基酸、寡肽、多肽，或是组成DNA、RNA的碱基对及其衍生物等。

本发明提供的通式（I）的20(S)和20(R)-达玛烷-3β,12β,20,25-四醇衍生物及其盐，其中：所述的盐为钾盐、钠盐、铵盐、镁盐、钙盐或盐酸盐。

本发明提供的20(S) 和20(R)-达玛烷-3β,12β,20,25-四醇衍生物及其盐中：

所述的氨基酸是20种蛋白质氨基酸，包括；丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、蛋氨酸、丝氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、天冬氨酸、谷氨酸等；

所述的碱基对包括腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶、尿嘧啶、胸腺嘧啶及其衍生物等；

所述的氨基酸的构型为D型和L型；

所述寡肽是2～20个氨基酸残基通过肽键连接形成的肽；

所述多肽由20个以上的氨基酸残基组成的肽。

所述的保护基是叔丁氧羰基（Boc-）、苄氧羰基（CBz-）、芴甲氧羰基（Fmoc-）等。

其中R1、R2可单取代、也可双取代。

本发明的式（I）化合物可按如下方法制备：

20(S)和20(R)-达玛烷-3β,12β,20,25-四醇衍生物是相应的氨基酸、寡肽和多肽在催化作用下与20(S)和20(R)-达玛烷-3β,12β,20,25-四醇进行酰化反应、脱保护反应而制得。反应的溶剂可以是四氢呋喃、二甲基甲酰胺、苯、甲苯、二氯甲烷、二甲基亚砜等，反应温度可以是0-150℃，可用的脱水剂可为二环己基碳二亚胺（DCC）、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC）等，可用的催化剂可为4-二甲氨基吡啶(DMAP)、1-羟基苯并三唑(HOBT)、三乙胺等，可用脱保护方法有三氟乙酸（TFA）、硅胶催化、溶液法等。

合成路线I：