[发明专利]G蛋白偶联受体的分离提取方法无效
申请号: | 201210060715.7 | 申请日: | 2012-03-09 |
公开(公告)号: | CN102558344A | 公开(公告)日: | 2012-07-11 |
发明(设计)人: | 刘建国;葛保胜;吕建仁;崔占峰 | 申请(专利权)人: | 中国石油大学(华东) |
主分类号: | C07K14/72 | 分类号: | C07K14/72;C07K1/34 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 266580 山东省*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 蛋白 受体 分离 提取 方法 | ||
1.G蛋白偶联受体的分离提取方法,是以截留分子量为100-300kDa的超滤膜超滤处理G蛋白偶联受体的粗酶液,最终获得高纯度的G蛋白偶联受体;所述G蛋白偶联受体的粗酶液是将细胞膜或G蛋白偶联受体重组表达的工程菌菌体破碎、表面活性剂增溶、离心后获得上清液。
2.根据权利要求1所述的提取G蛋白偶联受体的方法,其特征在于:所述用截留分子量为100-300kDa的超滤膜处理时,表面活性剂浓度为0-5%(w/v),溶液pH值2-10,离子强度0-1M。
3.根据权利要求1或2所述的提取G蛋白偶联受体的方法,其特征在于:所述表面活性剂为离子型表面活性剂、非离子型表面活性剂或两亲性肽分子表面活性剂。
4.根据权利要求1或2或3所述的G蛋白偶联受体的提取方法,其特征在于:所述用截留分子量为100-300kDa的超滤膜的组件形式为中空纤维素膜、平板膜或卷式膜。
5.权利要求1-4所述的提取G蛋白偶联受体的方法,经操作条件改进及超滤膜优化,可用于分离和纯化其它膜蛋白质。
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