[发明专利]一种荧光分析方法和装置

说明书

技术领域

本发明属于体外检测技术领域，具体地涉及一种基于测量荧光强度的分析方法和装置。

背景技术

在免疫检测领域中，常常需要对各类抗原或抗体进行定性或定量检测。现有技术中，以“竞争抑制和双抗夹心”为基础衍生出多种免疫反应分析方法，如：放射免疫法、酶联免疫法、化学发光法、时间分辨荧光法和荧光免疫法等，可用于确定病原微生物，对人体的特异性蛋白定量检测，从而对疾病进行辅助诊断或监测等等，用途非常广泛。这类免疫反应分析方法，通常将捕获抗体固定于固相载体，然后与抗原(目标蛋白)反应，洗涤后再与标记抗体反应，洗涤，最后检测放射性强度、溶液吸光度或光信号等，从而报告检测样本中目标蛋白的浓度。上述方法的自动化免去了人工洗涤的烦琐，但正因为自动化，使得仪器体积庞大价格昂贵，一般只在大型实验室使用。

1990年，Beggs等综合胶体金和免疫分析技术，建立了胶体金免疫层析法(GICA)，用于检测人尿和血清中的HCG(BEGGS M，NOVOTNY M，SAMPEDROS.A selfperforming chromatographic immunoassay for the qualitative determination of human chorionicgonadotrophin(HCG)in urine and serum[J].Clin Chem，1990，36：1084-1085)。此后20年，人们在GICA的基础上，开发出了用于病原体(CN 03115143.4)、激素(CN 200610014168.3)、心脏标志物(CN200410011165.5)、肿瘤标志物(CN 200510104796.6)、自身免疫病标志物(CN200410027291.X)等的检测试剂；同时也应用到食品、环境(CN 03116692.X)和兽医(CN 02139704.X)领域。由于该方法只需肉眼观察即可，非专业人士也可操作，使急诊、基层医院、病人床边和现场等远离大型实验室的地方开展相关检测成为可能，所以应用范围相当广泛。

虽然这种免疫分析技术已经超过20年的发展，但其基本的工作原理并未改变，这决定了到目前为止，它只用于定性或半定量检测(根据检测线灰度深浅定量)，且灵敏度也不如前述的定量免疫分析方法，其进一步的应用遇到了瓶颈。

因此，本领域急需对现有的胶体金层析方法进行变革，在赋予其高灵敏度和定量准确的新优势的同时，保持其快捷、简便、成本低廉等特点，从而进一步扩展其应用领域。

发明内容

本发明提供了一种测试片，用于定量检测样品中的待测物。

本发明提供了一种定量检测待测物的检测方法，所述方法灵敏度高，定量准确。

本发明还提供了一种定量检测待测物的检测装置。

本发明第一方面提供了一种测试片，该测试片包括：

(i)可加入样品的加样区；

(ii)位于加样区近端的结合区，所述结合区包含：

一种或多种可流动的结合剂，所述结合剂中至少一种被吸光物质标记，所述结合剂能与待测物或其等同物结合形成含吸光物质的复合物；和

可流动的检测剂，所述检测剂被荧光物质标记；

(iii)位于结合区近端和加样区远端的测试区，所述测试区包含固定化的捕获剂，所述捕获剂用于捕获从结合区移动至测试区的含吸光物质的复合物和检测剂；和

(iv)位于测试区近端和结合区远端的样品吸收区，其中吸收区具有吸收能力，从而使得加至加样区的样品从加样区扩散至末端样品吸收区；

其中，当所述捕获剂捕获所述含吸光物质的复合物和检测剂时，所述吸光物质影响所述测试区的荧光强度。

在另一优选例中，所述测试区的荧光为所述检测剂的荧光。

在另一优选例中，所述的吸光物质影响所述测试区的荧光强度是导致测试区的荧光强度下降。

在另一优选例中，所述待测物为抗原或抗体。

在另一优选例中，所述结合剂特异性结合待测物或其等同物；较佳地，所述结合剂为抗原、抗体或寡核苷酸。

在另一优选例中，所述结合区可以包含两种结合剂，其中，一种被吸光物质标记的结合剂，另一种被生物素标记的结合剂，所述两种结合剂同时与待测物结合，从而形成一种被生物素标记的含吸光物质的复合物。

在另一优选例中，所述含吸光物质的复合物可以含有待测物，也可以含有其等同物。

在另一优选例中，所述可流动的检测剂为荧光标记的生物素或捕获剂抗体。

在另一优选例中，所述捕获剂特异性结合含吸光物质的复合物和检测剂。