[发明专利]阻断HIV-1膜融合的小环型DNA重组载体及其应用有效
| 申请号： | 201210048534.2 | 申请日： | 2012-02-28 |
| 公开（公告）号： | CN103290049A | 公开（公告）日： | 2013-09-11 |
| 发明（设计）人： | 田波;潘煦文;孟颂东 | 申请（专利权）人： | 中国科学院微生物研究所 |
| 主分类号： | C12N15/79 | 分类号： | C12N15/79;C12N15/85;A61K48/00;A61P31/18 |
| 代理公司： | 北京市汉信律师事务所 11373 | 代理人： | 王文生 |
| 地址： | 100101 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 阻断 hiv 融合 小环 dna 重组 载体 及其 应用 | ||
1.能真核外分泌表达HIV-1膜融合抑制蛋白HR212的小环型DNA重组载体，其包含编码HR212蛋白的核苷酸序列和小环DNA载体。
2.根据权利要求1的小环型DNA重组载体，其中骨干序列是编码HR212蛋白的核苷酸序列，所述HR212蛋白是由HIV-1的一个氨基端七肽重复序列以及两个羧基端的七肽重复序列构成的三螺旋蛋白，其排列顺序为：
NH2HR2-linker1-HR1-linker2-HR2COOH，
其中HR1的氨基酸序列如SEQ ID No.33所示，HR2的氨基酸序列如SEQ ID No.34所示，
其中linker表示接头序列，linker1和linker2为长度可以在5-15个氨基酸残基之间的接头序列。
3.根据权利要求2的小环型DNA重组载体，其中linker1和linker2两个接头的氨基酸序列独立地选自SEQ ID Nos.12，14，16，和18。
4.根据权利要求3的小环型DNA重组载体，其中HR212蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。
5.根据权利要求1的小环型DNA重组载体，其还在HR212蛋白的氨基端和/或羧基端添加较短的标签序列，如Flag、或Strep II标签。
6.根据权利要求1的小环型DNA重组载体，其还带有细胞外膜锚定蛋白，如GPI，其氨基酸序列如SEQ ID No.30所示。
7.根据权利要求1的小环型DNA重组载体，其中在HR212蛋白的N端使用信号肽38sp，其氨基酸序列所SEQ ID No.20所示。
8.根据权利要求1的小环型DNA重组载体，其中所述小环DNA载体为pMC-BESPX-MCS2。
9.根据权利要求1-8中任一项的小环型DNA重组载体在制备用于抗HIV-1的感染的基因治疗剂中的应用。
10.一种阻断HIV-1膜融合过程的小环型DNA基因治疗剂，其包括根据权利要求1-8中任一项的小环型DNA重组载体作为活性成分。
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