[发明专利]检测孔雀石绿、无色孔雀石绿、无色结晶紫的单抗及酶联免疫方法与试剂盒

权利要求书

1.一种能识别孔雀石绿、无色孔雀石绿、无色结晶紫的单克隆抗体，其特征在于，它是由保藏号为CCTCC NO：C201143的杂交瘤细胞4B10所分泌的。

2.权利要求1所述的杂交瘤细胞4B10，保藏在中国典型培养物保藏中心，其保藏号为CCTCC NO：C201143。

3.包含权利要求1所述的单克隆抗体的试剂盒。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，该试剂盒是用于检测孔雀石绿、无色孔雀石绿、无色结晶紫的酶联免疫试剂盒。

5.一种用于检测孔雀石绿、无色孔雀石绿、无色结晶紫的酶联免疫方法，包括免疫原、包被原、抗体的制备以及样品的处理和检测，其步骤如下：

(1)将半抗原对-[3-(羧基)丙氧基]无色孔雀石绿与人血清白蛋白偶联得到免疫原；

(2)将半抗原对-[3-(羧基)丙氧基]无色孔雀石绿与卵清蛋白偶联得到包被原；

(3)利用步骤(1)的免疫原免疫小鼠，通过细胞融合与筛选得到保藏号为CCTCC NO：C201143的杂交瘤细胞4B10；

(4)用保藏号为CCTCC NO：C201143的杂交瘤细胞4B10制备单克隆抗体；

(5)用步骤(2)的包被原包被固相载体；

(6)取均质后的组织样品，用乙腈超声提取、离心，取乙腈层用氮气吹干，残渣用含0.05体积％吐温20的10mM PH为7.4的三羟甲基胺基甲烷-HCl溶液溶解，得到待测物；

(7)取待测物进行酶联免疫检测。

6.权利要求1所述的单克隆抗体在制备检测孔雀石绿、无色孔雀石绿、无色结晶紫的酶联免疫试剂盒中的应用。

7.权利要求3或4所述的试剂盒在动物源性食品中孔雀石绿、无色孔雀石绿、无色结晶紫检测中的应用。