[发明专利]葡糖淀粉酶变体有效
申请号: | 201210042998.2 | 申请日: | 2008-04-08 |
公开(公告)号: | CN102776164A | 公开(公告)日: | 2012-11-14 |
发明(设计)人: | W·埃赫勒;R·R·博特;I·尼古拉耶夫;M·谢弗斯;P·范索林恩;C·弗勒门 | 申请(专利权)人: | 丹尼斯科美国公司 |
主分类号: | C12N9/34 | 分类号: | C12N9/34;C12N15/56;C12N1/21;C12N1/15;C12N1/19;C12N5/10;C12P19/20;C12P7/02;C12P7/06;C12P7/16;A23K1/165;C12R1/885 |
代理公司: | 北京市中咨律师事务所 11247 | 代理人: | 柴云峰;黄革生 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 葡糖 淀粉酶 变体 | ||
1.分离的葡糖淀粉酶变体,其包含催化区和淀粉结合区(SBD),
(a)所述催化区包含与SEQ ID NO:3的氨基酸序列至少85%的序列同一性,和
(b)所述SBD包含SEQ ID NO:2中或者如通过序列比对确定的在亲本葡糖淀粉酶SBD中等同位置上的氨基酸取代N563I,N563C,N563E,N563A,N563K,N563L,N563Q,N563T或N563V;
所述葡糖淀粉酶变体与所述亲本葡糖淀粉酶相比具有增加的热稳定性。
2.权利要求1的分离的葡糖淀粉酶变体,其中所述催化区与SEQ ID NO:3的氨基酸序列有至少90%或至少95%的序列同一性。
3.权利要求1的葡糖淀粉酶变体,其中所述亲本葡糖淀粉酶包含与选自SEQ ID NO:11,SEQ ID NO:385,SEQ ID NO:386,SEQ ID NO:387,SEQ ID NO:388或SEQ ID NO:389的SBD有至少95%氨基酸序列同一性的SBD。
4.权利要求1的葡糖淀粉酶变体,其还包含在对应于SEQ ID NO:2的493,494,495,501,502,503,508,511,517,518,519,520,525,527,531,533,535,536,537,538,539,540,545,546,547,549,551,561,567,569,577,579或583位的位置上或者如通过序列比对确定的在所述亲本葡糖淀粉酶的等同位置上的一个或多个取代。
5.权利要求1的分离的葡糖淀粉酶变体,其还包含在对应于SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3的残基位置:10,14,15,23,42,45,46,59,60,61,67,68,72,73,97,98,99,102,108,110,113,114,122,124,125,133,140,144,145,147,152,153,164,175,182,204,205,214,216,219,228,229,230,231,236,239,240,241,242,244,263,264,265,268,269,276,284,291,300,301,303,310,311,313,316,338,342,344,346,349,359,361,364,379,382,390,391,393,394,408.410,415,417,418,430,431,433,436,442,443,444,448和451的位置上的一个或多个氨基酸取代。
6.权利要求1的葡糖淀粉酶变体,其中所述亲本葡糖淀粉酶得自木霉。
7.编码权利要求1的变体的多核苷酸。
8.包含权利要求7的多核苷酸的宿主细胞。
9.包含权利要求1的葡糖淀粉酶变体的酶组合物,其中该组合物适用于淀粉转化过程、动物饲料配制或醇发酵过程。
10.根据权利要求9的酶组合物,其适用于淀粉转化过程,还包含α淀粉酶。
11.在宿主细胞中产生变体葡糖淀粉酶的方法,包括用包含权利要求7的多核苷酸的DNA构建体转化宿主细胞;在适于表达和产生所述葡糖淀粉酶变体的条件下培养宿主细胞并产生所述变体。
12.根据权利要求11的方法,还包括从所述培养物回收葡糖淀粉酶变体。
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