[发明专利]一种合成D-异谷氨酰胺-D-色氨酸的方法

说明书

技术领域

本发明涉及多肽合成领域，特别涉及一种合成D-异谷氨酰胺-D-色氨酸的方法。

背景技术

D-异谷氨酰胺-D-色氨酸，也称为(R)-2-amino-5-((R)-1-carboxy-2-(1H-indol-2-yl)ethylamino)-5-oxopentanoic acid，Timodepressin，H-D-γ-Glu-D-Trp-OH，H-D-iGlu-D-Trp-OH，iDD或D-iEW，是一种合成血调节二肽，分子量：333.34，CAS登记号：186087-26-3。具有以下化学结构：

WO2008064465描述的合成方法中羧基保护基采用苄基或者1-4个C原子的烷基。该方法的合成路线如下：

US 5736519以Boc-D-Glu-OH和D-Trp-OH为原料，用DCC缩合后通过甲酸脱保护得到D-Glu-D-Trp-OH和D-iGlu-D-Trp-OH的混合物。最后通过Sephadex SP-PEA离子交换色谱柱分离得到D-Glu-D-Trp-OH和D-iGlu-D-Trp-OH，收率12.25％。这种合成方法一个明显的特点就是反应不具有选择性，同时得到D-Glu-D-Trp-OH和D-iGlu-D-Trp-OH，降低了合成收率，同时纯化的难度也随之增加。

除上述专利描述的方法之外，专利US 5744452，提供了D-iGlu-D-Trp-OH的对映异构体L-iGlu-L-Trp-OH(一种免疫促进剂)的合成方法。

专利US 5916878提供了两个D-iGlu-D-Trp-OH的非对映异构体D-iGlu-L-Trp-OH和L-iGlu-D-Trp-OH的合成路线。D-iGlu-L-Trp-OH的合成用Z-D-Glu-OBzl和L-Trp-OBzl为原料，L-iGlu-D-Trp-OH的合成用Z-D-Glu-OBzl和L-Trp-OBzl为原料，二者得到全保护二肽之后，通过氢化脱保护，分别得到L-iGlu-D-Trp-OH和D-iGlu-L-Trp-OH。

综上所述，D-iGlu-D-Trp-OH合成关键在于Glu和Trp保护基的选择。Glu的保护基可用通式：R¹-Glu-OR²来表示，Trp的保护基可用通式Trp(R³)-OR⁴来表示。R¹保护基选用Boc或者Cbz；R²选择苄基、烷基或者不保护，其中烷基优选Benzyl或Alkyl；R³通常可以不保护；R⁴一般选用苄基、烷基或者不保护，其中烷基优选Benzyl或Alkyl。但是纯化难度较大，用HPLC纯化无法满足工业化大生产的需要。因此，本发明提供一种合成收率较高、纯化简易的合成D-异谷氨酰胺-D-色氨酸的方法具有重要的现实意义。

发明内容

有鉴于此，本发明提供一种合成D-异谷氨酰胺-D-色氨酸的方法。该方法以R¹-D-Glu-OR²和D-Trp-OR²为初始原料，采用新的保护策略，R¹为Fmoc或者Cbz，R²为苄基或者1-4个碳原子的直链烷烃，经活化、缩合、碱解、氢解、纯化后即得。该方法对合成工艺要求较低，通过对D-iGlu-D-Trp-OH的纯化可得到高纯度D-iGlu-D-Trp-OH，拓展了D-iGlu-D-Trp-OH的合成路径。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种合成D-异谷氨酰胺-D-色氨酸的方法，以R¹-D-Glu-OR²为原料，Glu经HONb活化后得到活化酯R¹-D-Glu(ONb)-OR²，在碱性条件下与D-Trp-OR²发生缩合反应，得到中间体R¹-D-Glu(D-Trp-OR²)-OR²，所述中间体经碱解、氢解脱去保护基后得到D-iGlu-D-Trp-OH粗肽，纯化后获得D-iGlu-D-Trp-OH，即D-异谷氨酰胺-D-色氨酸；所述保护基R¹选自Fmoc或Cbz，所述保护基R²选自Bzl或1～4个碳原子的直链烷烃。